Ca2+ /钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ调节原肌球蛋白 1 对 海洛因所致心肌细胞节律异常的影响
Ca2+ /钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ调节原肌球蛋白 1 对 海洛因所致心肌细胞节律异常的影响
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DOI：
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发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
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通讯作者：
蒲红伟
中科院分区：
文献类型：
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作者：
季敏;苏丽萍;刘 丽;管雅玲;肖锦玲;蒲红伟
摘要: 目的 探讨 Ca2+ /钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ( Ca2+ /calmodulin-dependent protein kinaseII，.CaMKII) 调控原肌球蛋白 1( Tropomyosin1，TPM1) 在海洛因致心肌细胞节律异常中的作用。方法 提取.60 只 SPF 级 SD 大鼠乳鼠心肌组织，培养原代心肌细胞，根据干预情况分为对照组( Control 组) 、海洛.因处理组( HE 组) 、海洛因+KN-93 处理组( HE+KN-93 组) 。Control 组常规条件未作任何处理，HE.组 100 μmol /L 海洛因作用 24 h，HE+KN-93 组 100 μmol /L 海洛因+1 μmol /L 抑制剂 KN-93 作用 24.h。荧光倒置显微镜观察心肌细胞自发搏动频率的改变; Fluo-4 AM 检测各组细胞内 Ca2+.浓度的变.化; 串联质谱标记相对定量蛋白质组学筛查差异表达蛋白; Western blotting 法检测 TPM1、CaMKIIδ 型.及其 T287 位点［p-CaMKII( T287) ］表达水平。结果 心肌细胞自发搏动频率结果显示，Control 组平.均自发搏动频率( 126．33±1．52) 次/min 高于 HE 组( 88．00±2．64) 次/min，HE+KN-93 组自发搏动频率.( 110．33±1．52) 次/min 高于 HE 组( 88．00±2．64) 次/min，差异均有统计学意义( P＜0．05) 。Fluo-4 AM.检测结果显示，HE 组心肌细胞内 Ca2+.浓度与 Control 组比较显著增加( P＜0．05) ; HE+KN-93 组细胞内.Ca2+.浓度与 HE 组比较显著下降( P＜0．05) 。串联质谱标记相对定量蛋白质组学结果显示，HE 组与.Control 组共筛选出 784 个差异表达蛋白质，其中上调差异表达蛋白质有 442 个，下调差异表达蛋白.质有 342 个; HE 组与 HE+KN-93 组共筛选出 346 个差异表达蛋白质，其中上调差异表达蛋白质有.169 个，下调差异表达蛋白质有 177 个。Western blotting 结果显示，HE 组 p-CaMKII( T287) 、TPM1 蛋.白相对表达量与 Control 组比较，均显著增加( P＜0．05) ; HE+KN-93 组 p-CaMKII( T287) 、TPM1 蛋白相.对表达量与 HE 组比较均降低( P＜0．05) ; 3 组 CaMKIIδ 蛋白相对表达量均无统计学意义( P＞0．05) 。.结论 海洛因可造成心肌细胞节律异常改变，其机制可能与 CaMKII 激活后上调 TPM1 蛋白有关，这.有望为临床上因海洛因导致的心律失常患者提供新的诊疗方向。