Derivation of dorsal spinal sensory interneurons from human pluripotent stem cells.
Derivation of dorsal spinal sensory interneurons from human pluripotent stem cells.
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DOI：
10.1016/j.xpro.2021.100319
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发表时间：
2021-03-19
期刊：
影响因子：
--
通讯作者：
Butler SJ
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Gupta S;Yamauchi K;Novitch BG;Butler SJ
我们描述了从人类胚胎干细胞（hESCs）和诱导多能干细胞（iPSCs）中获得感觉脊髓间神经元（INs）的两种分化方案。在方案1中，我们使用维甲酸（RA）诱导疼痛、瘙痒和热介导的dI4/dI6中间神经元，在方案2中，使用RA与骨形态发生蛋白4 （RA+BMP4）在hPSC培养中诱导本体感觉dI1s和机械感觉dI3s。这些方案为开发恢复脊髓损伤患者感觉的治疗方法提供了重要的一步。有关使用和执行本协议的完整详情，请参阅。从人胚胎干细胞（hESCs）和诱导多能干细胞（iPSCs）中获得感觉脊髓间神经元（INs）的两种分化方法。在方案1中，我们使用维甲酸（RA）诱导疼痛、瘙痒和热介导的dI4/dI6中间神经元，在方案2中，使用RA与骨形态发生蛋白4 （RA+BMP4）在hPSC培养中诱导本体感觉dI1s和机械感觉dI3s。这些方案为开发恢复脊髓损伤患者感觉的治疗方法提供了重要的一步。
We describe two differentiation protocols to derive sensory spinal interneurons (INs) from human embryonic stem cells (hESCs) and induced pluripotent stem cells (iPSCs). In protocol 1, we use retinoic acid (RA) to induce pain, itch, and heat mediating dI4/dI6 interneurons, and in protocol 2, RA with bone morphogenetic protein 4 (RA+BMP4) is used to induce proprioceptive dI1s and mechanosensory dI3s in hPSC cultures. These protocols provide an important step toward developing therapies for regaining sensation in spinal cord injury patients. For complete details on the use and execution of this protocol, please refer to. Detailed methods to derive key spinal sensory interneurons from human stem cells Methods assess the identity and efficiency of sensory interneuron generation in vitro Descriptions of troubleshooting common problems during the differentiation protocol We describe two differentiation protocols to derive sensory spinal interneurons (INs) from human embryonic stem cells (hESCs) and induced pluripotent stem cells (iPSCs). In protocol 1, we use retinoic acid (RA) to induce pain, itch and heat mediating dI4/dI6 interneurons, and in protocol 2, RA with bone morphogenetic protein 4 (RA+BMP4) is used to induce proprioceptive dI1s and mechanosensory dI3s in hPSC cultures. These protocols provide an important step toward developing therapies for regaining sensation in spinal cord injury patients.
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Baloh RH