下调ANRIL对Kasumi-1细胞增殖和凋亡的影响及其相关作用机制研究
下调ANRIL对Kasumi-1细胞增殖和凋亡的影响及其相关作用机制研究
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DOI：
10.19746/j.cnki.issn1009-2137.2022.04.002
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发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
--
通讯作者：
韦四喜
中科院分区：
文献类型：
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作者：
张成思;许建霞;邓发滑;胡华丽;王斯奇;黄海;韦四喜
目的:探讨下调ANRIL(Antisense non-coding RNA in the INK4 Locus)表达对Kasumi-1细胞增殖和凋亡的影响及其相关分子机制。方法:使用重组慢病毒构建下调ANRIL表达的Kasumi-1细胞(sh-ANRIL组)及其对照组细胞(sh-NC组),荧光显微镜观察慢病毒对细胞的转染效率,RT-qPCR检测敲低效率及急性髓细胞白血病(AML)患者外周血和骨髓中ANRIL的表达水平。CCK-8法和流式细胞术检测下调ANRIL表达对Kasumi-1细胞增殖和凋亡的影响。Western blot检测下调ANRIL表达后Kasumi-1细胞中PI3K、AKT、p-AKT等相关蛋白分子的表达。结果:ANRIL在AML患者外周血和骨髓中呈高表达;重组慢病毒对Kasumi-1细胞的转染效率>90%,敲低效率为70%;CCK-8结果显示,下调Kasumi-1细胞中ANRIL表达能够显著抑制细胞增殖,当DNR作用24、48、72 h,sh-ANRIL组的细胞增殖抑制率分别为(47.40±1.49)%、(69.11±0.51)%和(91.82±1.10)%,均显著高于sh-NC组(40.69±1.70)%(P<0.05)、(58.93±1.74)%(P<0.01)和(82.93±0.37)%(P<0.001);流式细胞术分析显示,sh-ANRIL组细胞凋亡率为(10.29± 0.58)%,显著高于sh-NC组的(5.42±0.67)%(P<0.01),当DNR作用24 h,sh-ANRIL组细胞凋亡率为(54.41±1.69)%,显著高于sh-NC组的(38.28±1.42)%(P<0.001);Western blot结果显示,sh-ANRIL组PI3K、p-AKT、PCNA、BCL-2蛋白水平较sh-NC组显著降低,而BAX蛋白的表达增加。结论:ANRIL可能通过PI3K/AKT信号通路影响Kasumi-1细胞增殖和凋亡,ANRIL是AML的潜在治疗靶点。