Real-Time Quantitative Reverse Transcription PCR for Detection of Opioid Receptors in Immune Cells.
Real-Time Quantitative Reverse Transcription PCR for Detection of Opioid Receptors in Immune Cells.
复制标题
用于检测免疫细胞中阿片受体的实时定量逆转录 PCR
DOI：
10.1007/978-1-0716-0884-5_8
复制
发表时间：
2021
影响因子：
--
通讯作者：
Machelska H
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Celik MÖ;Labuz D;Machelska H
实时定量逆转录-聚合酶链式反应(QRT-PCR)是一种基于扩增mRNA的高灵敏度的分子生物学方法，用于检测和定量目的基因的水平。在这一章中，我们描述了实时荧光定量聚合酶链式反应来检测和定量免疫细胞中阿片受体的mRNA。具体地说，我们分析了从血液和坐骨神经中分离出来的小鼠免疫细胞，这些细胞暴露在慢性挤压损伤中，这代表了一种神经病理性疼痛的模型。我们详细描述了诱导慢性收缩损伤，从血液和损伤的神经中分离免疫细胞，从免疫细胞中分离总核糖核酸，从总核糖核酸中进行c DNA逆转录，以及对μ-，δ-和κ-阿片受体mRNAs进行实时定量逆转录聚合酶链式反应的要求和技术。
Real-time quantitative reverse transcription-PCR (qRT-PCR ) is a highly sensitive molecular biology method based on the amplification of the cDNA of mRNA to detect and quantify the levels of mRNA of interest. In this chapter, we describe real-time qRT-PCR to detect and quantify mRNA of opioid receptors in immune cells. Specifically, we analyze mouse immune cells isolated from the blood and sciatic nerves exposed to a chronic constriction injury, which represents a model of neuropathic pain. We describe in detail the requirements and techniques to induce the chronic constriction injury, to isolate immune cells from the blood and injured nerves, to isolate the total RNA from immune cells, to perform a cDNA reverse transcription from the total RNA, and to perform real-time qRT-PCR for μ-, δ-, and κ-opioid receptor mRNAs.
登录
查看更多内容
影响因子：
15.1
作者：
Celik, Melih Oe;Labuz, Dominika;Machelska, Halina
通讯作者：
Machelska, Halina
μ-阿片受体抗体显示小鼠受损神经干处的组织依赖性特异性染色和神经元 μ-受体免疫反应性增加
影响因子：
3.7
作者：
Y. Schmidt;C. Gaveriaux;H. Machelska
通讯作者：
H. Machelska
影响因子：
3.7
作者：
Schmidt FM;Kratzsch J;Gertz HJ;Tittmann M;Jahn I;Pietsch UC;Kaisers UX;Thiery J;Hegerl U;Schönknecht P
通讯作者：
Schönknecht P
影响因子：
10.8
作者：
S. Mousa;M. Shaqura;Mohammed A Al-Madol;S. Tafelski;Baled I. Khalefa;M. Shakibaei;M. Schäfer
通讯作者：
S. Mousa;M. Shaqura;Mohammed A Al-Madol;S. Tafelski;Baled I. Khalefa;M. Shakibaei;M. Schäfer