Identification of a ubiquitin-protein ligase subunit within the CCR4-NOT transcription repressor complex
Identification of a ubiquitin-protein ligase subunit within the CCR4-NOT transcription repressor complex
复制标题
DOI：
10.1093/emboj/21.3.355
复制
发表时间：
2002-02-01
期刊：
影响因子：
11.4
通讯作者：
Timmers, HTM
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Albert, TK;Hanzawa, H;Timmers, HTM
环指蛋白hocT 4是CCR 4-NOT复合物的组成部分。该复合物涉及RNA聚合酶II转录的抑制。在这里，我们证明了hocT 4作为一个泛素蛋白连接酶（E3）的功能。我们发现，独特的C4 C4环域的hocT 4相互作用的一个子集的泛素结合酶（E2）。使用NMR光谱，我们详细的相互作用的hocT 4与UbcH 5 B和表征环残基，这是至关重要的相互作用。hocT 4在体外充当有效的E3连接酶。使E2-E3界面不稳定的突变消除了这种活性。基于这些结果，我们提出了一个模型，如何E3连接酶的功能内的CCR 4-NOT复合物涉及到转录调控。
The RING finger protein CNOT4 is a component of the CCR4-NOT complex. This complex is implicated in repression of RNA polymerase II transcription. Here we demonstrate that CNOT4 functions as a ubiquitin-protein ligase (E3). We show that the unique C4C4 RING domain of CNOT4 interacts with a subset of ubiquitin-conjugating enzymes (E2s). Using NMR spectroscopy, we detail the interaction of CNOT4 with UbcH5B and characterize RING residues that are critical for this interaction. CNOT4 acts as a potent E3 ligase in vitro. Mutations that destabilize the E2-E3 interface abolish this activity. Based on these results, we present a model of how E3 ligase function within the CCR4-NOT complex relates to transcriptional regulation.