不同保存期单采血小板外泌体基因测序和蛋白组学的分析

不同保存期单采血小板外泌体基因测序和蛋白组学的分析
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DOI:
10.19746/j.cnki.issn1009-2137.2022
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发表时间:
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期刊:
中国实验血液学杂志
影响因子:
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通讯作者:
汪德清
汪德清
中科院分区:
其他
文献类型:
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作者:
李小飞;张媛;蒲霏;宋英伟;汪德清

文献摘要

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目的:明确不同保存期单采血小板(AP)外泌体基因测序和蛋白组学的差异变化,预测不同保存期 AP 外泌体的功能。方法:留取不同保存期 D0、D3 和 D5的单采血小板,用高速离心法提取外泌体,进行基因测序和蛋白组学分析,生物信息学分析并预测血小板外泌体的生物学功能。液相质谱分析技术检测外泌体蛋白的变化和功能预测;制备小RNA 测序文库,对构建好的文库进行测序和生物信息学技术数据分析。结果:AP 外泌体 iTRAQ 蛋白分析显示,与D0 相比,D3 储存的AP 外泌体有55 个上调蛋白和 94 个下调蛋白(P1.2),D5 储存的AP 外泌体有 292 个上调蛋白和 53 个下调蛋白(P1.2)。KEGG 通路分析结果表明,这些蛋白主要参与转运和代谢、免疫系统、癌症以及膜转运等过程。保存 D0、D3 和 D5 AP 释放的外泌体 miRNA 相比具有明显的统计学差异(P<0.01),其中D3 与D0 的外泌体miRNA 相比,上调 miRNA 数为374,下调 miRNA 数为 255;保存 D5 与D0 的外泌体 miRNA 相比,上调 miRNA 数为 297,下调 miRNA 数为 242;保存 D5 与D3 的外泌体 miRNA 相比,上调 miRNA 数为 252,下调 miRNA 数为327。对差异外泌体.miRNA的靶基因进行 GO 富集分析,差异 miRNA的靶基因主要参与膜的组成,发挥与蛋白结合的分子功能,并参与转录调.控的生物过程。结论:AP 保存末期与初期相比外泌体差异蛋白和差异 miRNA 显著变化,分别参与多种的生物过程。