Chemoenzymatic synthesis of 2-azidoethyl-ganglio-oligosaccharides GD3, GT3, GM2, GD2, GT2, GM1, and GD1a
Chemoenzymatic synthesis of 2-azidoethyl-ganglio-oligosaccharides GD3, GT3, GM2, GD2, GT2, GM1, and GD1a
复制标题
DOI：
10.1016/j.carres.2005.06.008
复制
发表时间：
2005-09-05
影响因子：
3.1
通讯作者：
Wakarchuk, W
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Blixt, O;Vasiliu, D;Wakarchuk, W
利用空肠弯曲杆菌的糖基转移酶合成了几种神经节寡糖结构。α -(2 -> 3/8)-唾液基转移酶（Cst-II）、β -(1 -> 4)- n -乙酰半乳糖氨基转移酶（CgtA）和β -(1 -> 3)-半乳糖基转移酶（CgtB）是由大肠杆菌大规模发酵产生的酶，并根据它们的受体特异性进行了进一步的表征。2-Azidoethyl-glycosides对应的低聚糖GD3(α- (D) -Neup5Ac - (2 - > 8) - alpha - (D) -Neup5Ac(2 - > 3)β- (D) galp(1 - > 4)β- (D) -Glcp), g3(α- (D) -Neup5Ac - (2 - > 8) - alpha - (D) -Neup5Ac (2 - > 8) - alpha - (D) -Neup5Ac(2 - > 3)β- (D) galp(1 - > 4)β- (D) -Glcp), GM2(β- (D) -GalpNAc -(1 - > 4) -(α- (D) -Neup5Ac(2 - > 3)]β- (D) galp(1 - > 4)β- (D) -Glcp),阻止GD2(β- (D) -GalpNAc -(1 - > 4) -(α- (D) -Neup5Ac (2 - > 8) - alpha - (D) -Neup5Ac(2 - > 3)]β- (D) galp(1 - > 4)β- (D) -Glcp), GT2(β- (D) -GalpNAc -(1 - > 4) -[(α- (D) -Neup5Ac -(2 - 8) >]β- (D) -Neup5Ac (2 - > 8) - alpha - (D) -Neup5Ac(2 - > > 3)β- (D) galp(1 - > 4)β- (D) -Glcp),和GM1(β- (D) galp -(1 - > 3)β- (D) -GalpNAc(1 - > 4) -(α- (D) -Neup5Ac(2 - > 3)]β- (D) galp(1 - > 4)β- (D) -Glcp)合成了高收益率(gram-scale)。此外，利用哺乳动物a-(23)-唾液基转移酶（ST3Gal 1）对GM1进行唾液化，生成GD1a (α -(D)- neup5ac -(2 -> 3)- β -(D)- galp -(1 -> 3)- β -(D)- galpnac -(1 -> 4)-[α -(D)- neup5ac -(2 -> 3)]- β -(D)- galp -(1 -> 4)- β -(D)- glcp -)低聚糖。我们还在大肠杆菌AD202细胞中克隆并表达了一种大鼠udp - n -乙酰氨基葡萄糖-4 '- epimase (GaINAcE)，从而节省了将较便宜的UDP-GIcNAc原位转化为UDP-GaINAc的成本。(c) 2005 Elsevier Ltd版权所有。
We have synthesized several ganglio-oligosaccharide structures using glycosyltransferases from Campylobacter jejuni. The enzymes, alpha-(2 -> 3/8)-sialyltransferase (Cst-II), beta-(1 -> 4)-N-acetylgalactosaminyltransferase (CgtA), and beta-(1 -> 3)-galactosyltransferase (CgtB), were produced in large-scale fermentation from Escherichia coli and further characterized based on their acceptor specificities. 2-Azidoethyl-glycosides corresponding to the oligosaccharides of GD3 (alpha-(D)-Neup5Ac-(2 -> 8)-alpha-(D)-Neup5Ac-(2 -> 3)-beta-(D)-Galp-(1 -> 4) -beta-(D)-Glcp-), GT3 (alpha-(D)-Neup5Ac-(2 -> 8)-alpha-(D)-Neup5Ac-(2 -> 8)-alpha-(D)-Neup5Ac-(2 -> 3)-beta-(D)-Galp-(1 -> 4)-beta-(D)-Glcp-), GM2 (beta-(D)-GalpNAc-(1 -> 4)-[alpha-(D)-Neup5Ac-(2 -> 3)]-beta-(D)-Galp-(1 -> 4)-beta-(D)-Glcp-), GD2 (beta-(D)-GalpNAc-(1 -> 4)-[alpha-(D)-Neup5Ac-(2 -> 8)-alpha-(D)-Neup5Ac-(2 -> 3)]-beta-(D)-Galp-(1 -> 4)-beta-(D)-Glcp-), GT2 (beta-(D)-GalpNAc-(1 -> 4)-[(alpha-(D)-Neup5Ac-(2 -> 8)]-beta-(D)-Neup5Ac-(2 -> 8)-alpha-(D)-Neup5Ac-(2 -> -> 3)beta-(D)-Galp-(1 -> 4)-beta-(D)-Glcp-), and GM1 (beta-(D)-Galp-(1 -> 3)-beta-(D)-GalpNAc-(1 -> 4)-[alpha-(D)-Neup5Ac-(2 -> 3)]-beta-(D)-Galp(1 -> 4)-beta-(D)-Glcp-) were synthesized in high yields (gram-scale). In addition, a mammalian a-(2 3)-sialyltransferase (ST3Gal 1) was used to sialylate GM1 and generate GD1a (alpha-(D)-Neup5Ac-(2 -> 3)-beta-(D)-Galp-(1 -> 3)-beta-(D)-GalpNAc-(1 -> 4)-[alpha-(D)-Neup5Ac-(2 -> 3)]-beta-(D)-Galp-(1 -> 4)-beta-(D)-Glcp-) oligosaccharide. We also cloned and expressed a rat UDP-N-acetylglucosamine-4 '-epimerase (GaINAcE) in E. coli AD202 cells for cost saving in situ conversion of less expensive UDP-GIcNAc to UDP-GaINAc. (c) 2005 Elsevier Ltd. All rights reserved.