Aqueous access channels in subunit a of rotary ATP synthase
Aqueous access channels in subunit a of rotary ATP synthase
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DOI：
10.1074/jbc.m210199200
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发表时间：
2003-02-21
影响因子：
4.8
通讯作者：
Fillingame, RH
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Angevine, CM;Fillingame, RH
亚基 a 在大肠杆菌 F1F0 质子易位中的作用。人们对 ATP 合酶知之甚少。在酶的膜结合 F-o 区段中，H+ 结合和释放发生在亚基 c 第二跨膜螺旋 (TMH) 中间的 Asp(61) 处。质子被认为通过至少部分由亚基 a 的五个 TMH 中的一个或多个形成的水通道到达 Asp(61)。在本报告中，我们将 Cys 替换为 a 亚基第四个 TMH 的 19 个残基跨度，并使用化学修饰来获取有关沿该螺旋的残基的水可及性的信息。残基 206、210 和 214 可以从膜的细胞质侧进入 N-乙基-马来酰亚胺，并且可能位于 H+ 运输路线上。 TMH4 上的残基 215 和 218 以及 TMH5 上的残基 245 是 Ag+ 可接近的，但 N-乙基苹果酰亚胺不可接近的，并且可能形成从亚基 c 的 Asp(61) 延伸到周质表面的水袋的一部分。
The role of subunit a in proton translocation by the Escherichia coli F1F0. ATP synthase is poorly understood. In the membrane-bound F-o sector of the enzyme, H+ binding and release occurs at Asp(61) in the middle of the second transmembrane helix (TMH) of subunit c. Protons are thought to reach Asp(61) via an aqueous access pathway formed at least in part by one or more of the five TMHs of subunit a. In this report, we have substituted Cys into a 19-residue span of the fourth TMH of subunit a and used chemical modification to obtain information about the aqueous accessibility of residues along this helix. Residues 206, 210, and 214 are N-ethyl-maleimide-accessible from the cytoplasmic side of the membrane and may lie on the H+ transport route. Residues 215 and 218 on TMH4, as well as residue 245 on TMH5, are Ag+-accessible but N-ethylmalcimide-inaccessible and may form part of an aqueous pocket extending from Asp(61) of subunit c to the periplasmic surface.