两种人胚胎干细胞系向神经元方向诱导分化的比较研究
两种人胚胎干细胞系向神经元方向诱导分化的比较研究
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DOI：
10.16557/j.cnki.1000-7547.2022.01.004
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发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
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通讯作者：
王亚周
中科院分区：
文献类型：
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作者：
陈安迪;李子杰;赵又谊;武胜昔;刘加强;王亚周
目的:比较研究两种人胚胎干细胞系H8和H9在维持培养、向神经前体细胞和神经元方向分化的特性。方法:采用mTeSR1做为基本培养基,Matrigel做为基质胶,进行无滋养层的维持培养。采用白细胞抑制因子1(Smad-1)双抑制剂的神经前体细胞诱导,和含B27的Neurobasal联合脑源性神经营养因子(BDNF) 、胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)的神经元诱导方案。采用免疫荧光化学染色检测胚胎干细胞标记蛋白(Nanog和OCT4) 、神经前体细胞标记蛋白(Nestin、Sox2和Pax6) 、神经元标记蛋白Tuj-1的表达。结果:在维持培养和神经诱导的早期: H8和H9细胞在胚胎干细胞标记蛋白表达及类胚体形成方面无显著差异。神经前体细胞阶段:诱导分化相同时间(诱导14 d),两种细胞系的玫瑰花环样结构形成,及巢蛋白(Nestin) 、SRY转录因子2 (Sox2)的表达均无显著差异;相对而言,更高比例的H9细胞表达神经前体细胞标记蛋白成对同源基因盒6 (Pax6) 。神经元阶段:诱导相同时间(诱导30 d),约89%的H9细胞表达神经元标记蛋白Tuj-1,而仅约34%的H8细胞表达Tuj-1。结论: H8、H9细胞的胚胎干细胞特性相似。与H8相比,H9细胞的神经元方向分化效率更高,更适合进行神经系统疾病机制及转化研究。