牛羊胎盘免疫调节因子的提取及对PANC-Ⅰ增殖和迁移影响的比较
牛羊胎盘免疫调节因子的提取及对PANC-Ⅰ增殖和迁移影响的比较
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DOI：
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发表时间：
2016
期刊：
影响因子：
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通讯作者：
李雪玲
中科院分区：
文献类型：
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作者：
王晶;林志颖;林立梅;李夏伟;侯东霞;李雪玲
胎盘免疫调节因子(placenta immunoregulating factor, PF)是从胎盘提取的小分子多肽，对病毒性.疾病、免疫缺陷疾病及恶性肿瘤等具有潜在的临床应用价值。为检测牛(Bos taurus)和绵羊(Ovis aries)胎.盘免疫调节因对人(Homo sapiens)胰腺癌细胞(pancreatic cancer cells-Ⅰ, PANC-Ⅰ)增殖与迁移的影响，本.研究对从屠宰场获得的牛和绵羊胎盘进行分离，利用双酶水解法制备PF，将质量浓度为100~2 000 ng/mL.的牛、羊PF 作用于体外培养的PANC-Ⅰ细胞，以3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-5-(3-羧甲酯基)-2-(4-磺苯基)-.2H-四唑(3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfophenyl)-2H-tetrazolium, MTS).法观察细胞增殖抑制率，应用流式细胞技术检测其对PANC-Ⅰ细胞周期的影响。并利用Transwell 迁移.实验检测添加PF 对PANC-Ⅰ细胞迁移能力的影响，同时通过实时荧光定量PCR 法检测肿瘤抑制基因.(tumor suppressor gene, P53) 和细胞周期依赖性蛋白激酶抑制因子1A 基因(cyclin- dependent kinase.inhibitor 1A, P21)的表达情况。结果显示，17.11 g 绵羊胎盘制得0.588 mg PF，6.61 g 牛胎盘制得0.312 mg.PF，胎盘质量与所得PF的质量比约为20 000∶1。在体外培养的PANC-Ⅰ细胞培养液中添加PF，从形态上.观察，牛羊PF 对PANC-Ⅰ细胞没有明显的影响。绵羊PF 处理后PANC-Ⅰ细胞增殖抑制率为9.75%~.22.89%，牛PF 处理后PANC-Ⅰ细胞增殖抑制率为-3.81%~23.56%，增殖抑制率最显著的绵羊PF 浓度为.500 ng/mL，牛PF浓度为1 000 ng/mL。绵羊PF在浓度为500 ng/mL时，PANC-Ⅰ细胞的PI 和SPF最低，而.牛PF各浓度下的胰腺癌细胞增殖指数(proliferation index, PI)和增殖活性(S-phase fraction, SPF)没有明显.的变化。同时，牛羊PF对PANC-Ⅰ细胞的迁移能力无显著影响。牛羊PF使PANC-I细胞P53 表达上调而.P21 表达下调。上述结果表明，在一定浓度下，PF对体外培养的PANC-Ⅰ细胞增殖有负调控作用，且牛羊.胎盘免疫调节因子对胰腺癌细胞的影响不同，可能因为其存在的活性成分有区别。本研究为胰腺癌的治.疗提供了新的思路。