干扰素 α 对乙型肝炎病毒 X 蛋白诱导小鼠 足细胞系凋亡的影响及分子机制研究

干扰素 α 对乙型肝炎病毒 X 蛋白诱导小鼠 足细胞系凋亡的影响及分子机制研究
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DOI:
10.7499/j.issn.1008-8830.2019.09.017
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发表时间:
2019
期刊:
中国当代儿科杂志
影响因子:
--
通讯作者:
刘璟
刘璟
中科院分区:
其他
文献类型:
--
作者:
孙永红;雷晓燕;陈星星;崔维静;刘璟

文献摘要

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【摘要】 目的 观察干扰素α(INF-α)对乙肝病毒X蛋白 (HBx)诱导的小鼠足细胞系(MPC5)凋亡的影响。方法 采用携带HBx基因的pEX质粒转染MPC5细胞,采用流式细胞术检测HBx转染后MPC5凋亡情况。将MPC5分为正常条件培养MPC5 (Contral)组;正常MPC5 + INF-α共培养(INF-α)组; HBx诱导MPC5(HBx)组; HBx诱导MPC5与INF-α共培养(HBx+ INF-α)组。不同实验条件下干预24h后,观察足细胞凋亡情况,用RT-PCR法和Westerm印迹方法分别检测足细胞相关蛋白nephrin、CD2AP、synaptopodin和TRPC6 mRNA及蛋白的表达。结果 pEX-HBx 转染MPC5细胞后48小时HBx表达最高,转染HBx基因后足细胞凋亡率显著增高(P值均0.05),足细胞 nephrin、 synaptopodin、CD2AP和TRPC6的mRNA和蛋白表达水平的差异无统计学意义(均P>0.05);与Contral组相比,HBx组,足细胞凋亡明显增加,差异有统计学意义(均P<0.05), nephrin、synaptopodin、CD2 AP mRNA和蛋白的表达水平明显降低(均P<0.05),TRPC6mRNA和蛋白的表达水平明显增高(均P<0.05)。与HBx组相比,HBx+INF-α组,足细胞凋亡明显缓解,nephrin、 synaptopodin、CD2 AP mRNA和蛋白的表达水平明显增高(均P<0.05),TRPC6mRNA和蛋白表达水平明显降低(均P<0.01)。结论HBx可促进足细胞凋亡;INF-α 可改善HBx诱导的足细胞的凋亡,促进足细胞足突之间的裂孔隔膜相关蛋白(nephrin、CD2AP)和细胞骨架相关蛋白(synaptopodin)的表达。