Extracellular ATP, intracellular calcium and canalicular contraction in rat hepatocyte doublets
Extracellular ATP, intracellular calcium and canalicular contraction in rat hepatocyte doublets
复制标题
大鼠肝细胞双联体中的细胞外 ATP、细胞内钙和小管收缩
DOI：
10.1002/hep.1840140411
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发表时间：
1991
期刊：
影响因子：
13.5
通讯作者：
I. Arias
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
T. Kitamura;U. Brauneis;Z. Gatmaitan;I. Arias
推测大鼠肝细胞双联体中的胆小管收缩涉及肌动球蛋白系统的激活。我们通过在细胞外添加 ATP 或微透析肌球蛋白轻链激酶或其不依赖 Ca2+ 的片段（保留催化活性）后确定小管收缩与囊性游离 Ca2+ ([Ca2+]i) 浓度之间的关系来检验这一假设。在没有细胞外 Ca2+ 的情况下，用 200 μmol/L ATP 孵育双联体后，[Ca2+]i 在 40 秒时达到峰值，71% 的小管在 4 分钟内收缩。使用等摩尔的 ADP、AMP 和不可水解的 ATP 观察到效果降低，但使用腺苷则没有观察到效果。细胞外 ATP 对 [Ca2+]i 和小管收缩的影响呈剂量依赖性。添加细胞外 Ca2+ 和 ATP 导致 [Ca2+]i 达到平台水平。细胞松弛素 D 解聚肌动蛋白丝，抑制 ATP 诱导的小管收缩，但不抑制肌球蛋白轻链激酶及其 Ca2+ 独立片段（但不是热变性片段、白蛋白、胰蛋白酶加大豆抑制剂或缓冲液）微透析到双联体的一个肝细胞中的 [Ca2+ 增加，导致 86% 的双联体中的小管收缩。注射肌球蛋白轻链激酶或其 Ca2+ 独立片段不会在 5 分钟内增加 [Ca2+]i。这些结果表明（a）肝细胞的基底外侧质膜具有 P2Y 类嘌呤受体，（b）与 ATP 孵育后 [Ca2+]i 增加最初是由于内部位点的动员所致，（c）小管收缩与 [Ca2+]i 和肌动蛋白-肌球蛋白系统的激活直接相关。细胞外 ATP 在小管收缩中的生理作用尚不确定。 （肝病学 1991；14：640–647。）
Bile‐canaliculus contraction in rat hepatocyte doublets is postulated to involve activation of an actinmyosin system. We examined this hypothesis by determining the relationship between canalicular contraction and cystolic free Ca2+ ([Ca2+]i) concentration after extracellular addition of ATP or microdialysis of myosin light chain kinase or its Ca2+‐independent fragment, which retains catalytic activity. After incubation of doublets with 200 μmol/L ATP in the absence of extracellular Ca2+, [Ca2+]i peaked at 40 sec and 71% of canaliculi contracted within 4 min. Decreasing effects were observed with equimolar ADP, AMP and nonhydrolyzable ATP, but no effect was observed with adenosine. The effect of extracellular ATP on [Ca2+]i and canalicular contraction was dose dependent. Addition of extracellular Ca2+ and ATP resulted in a plateau level of [Ca2+]i. Cytochalasin D, which depolymerizes actin filaments, inhibited ATP‐induced canalicular contraction, but not the increase in [Ca2+ Microdialysis of myosin light chain kinase and its Ca2+‐independent fragment (but not the heatdenatured fragment, albumin, trypsin plus soybean inhibitor or buffer) into one hepatocyte of a doublet resulted in canalicular contraction in 86% of doublets. Injection of myosin light chain kinase or its Ca2+‐independent fragment did not increase [Ca2+]i within 5 min. These results indicate that (a) the basolateral plasma membrane of hepatocytes has a P2Y‐class purinoceptor, (b) increased [Ca2+]i after incubation with ATP is initially due to mobilization from internal sites and (c) canalicular contraction is directly related to [Ca2+]i and activation of an actin‐myosin system. The physiological role of extracellular ATP in canalicular contraction is uncertain. (HEPATOLOGY 1991;14:640–647.)
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Ca2()动员激素刺激Ca2从肝细胞流出。
DOI：
--
发表时间：
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Hartshorne,DJ
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1985
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1989
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--
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Reinlib,L;Mikkelsen,R;Zahniser,D;Dharmsathaphorn,K;Donowitz,M
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Donowitz,M