丹参酮IIA通过自噬诱导肺癌A549细胞周期阻滞的作用研究
丹参酮IIA通过自噬诱导肺癌A549细胞周期阻滞的作用研究
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DOI：
10.19378/j.issn.1003-9783.2020.05.007
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发表时间：
2020
期刊：
影响因子：
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通讯作者：
白莎莎
中科院分区：
文献类型：
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作者：
温文浩;侯雪楠;崔赛男;沈崇坤;叶然;崔永飞;林慧媛;白莎莎
目的观察丹参酮IIA(Tanshinone IIA,TIIA)对人非小细胞肺癌A549细胞增殖的影响,探讨TIIA诱导A549细胞自噬与细胞周期阻滞的关系。方法采用CCK8法检测TIIA(0.5、1、2、4、8 μmol·L~(-1))对A549细胞增殖的抑制作用;利用流式细胞术检测TIIA(1、2、4 μmol·L~(-1))对A549细胞周期分布的影响;采用Western Blot法检测TIIA(1、2、4 μmol·L~(-1))对A549细胞周期相关蛋白Cyclin D1和自噬相关蛋白p62、LC3B表达的影响;分别采用自噬激动剂雷帕霉素(Rapamycin,RAPA;0.25 μmol·L~(-1))+TIIA(2 μmol·L~(-1))或自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA,5 mmol·L~(-1))+TIIA(2 μmol·L~(-1))培养处理A549细胞,然后采用Western Blot法检测细胞Cyclin D1、p62、LC3B蛋白的表达,并通过流式细胞术检测细胞周期分布。结果与对照组比较,TIIA不同浓度组对A549细胞均具有明显的增殖抑制作用(P <0.05,P <0.01),且呈时间-剂量依赖关系;药物作用12、24 h后,TIIA的IC_(50)值分别为7.82、2.04 μmol·L~(-1)。与对照组比较,TIIA能降低A549细胞Cyclin D1的表达量(P <0.01),使细胞周期阻滞于G0/G1期(P <0.05,P <0.01),且呈剂量依赖性;TIIA能够升高A549细胞LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值(P <0.05,P <0.01),降低p62表达(P <0.01),诱导细胞发生自噬。与TIIA组比较,3-MA+TIIA组A549细胞中的LC3-II/LC3-I比值明显降低(P <0.01),p62及Cyclin D1表达水平明显上调(P <0.01),停滞于G0/G1期的细胞比例明显减少(P <0.05)。结论TIIA可能通过上调人非小细胞肺癌A549细胞自噬诱导细胞周期阻滞,从而抑制细胞增殖,发挥抗肿瘤作用。