雷公藤红素依赖ROS升高介导DNA损伤诱导肝癌细胞凋亡
雷公藤红素依赖ROS升高介导DNA损伤诱导肝癌细胞凋亡
复制标题
DOI：
10.12360/cpb202105014
复制
发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
--
通讯作者：
周静
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
马静;王红磊;王梓萱;李昕宇;李美秀;吴勇;刘禹佳;卢国栋;周静
目的探究雷公藤红素(celastrol)诱导细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)产生在介导细胞DNA损伤中的作用及对肝癌细胞凋亡的影响。方法人肝癌细胞经雷公藤红素处理后,镜下观察细胞形态变化;MTT法测定肝癌细胞的存活率;Hoechst 33258染色观察肝癌细胞核变化;流式细胞术检测细胞死亡;CM-H2DCFDA探针检测细胞内ROS水平;免疫荧光方法检测细胞内DNA损伤标志蛋白γ-H2AX的荧光强度;Western blot检测γ-H2AX、caspase-3、 PARP等蛋白表达水平。结果雷公藤红素可显著抑制肝癌细胞的存活,并可升高细胞内ROS水平,呈浓度依赖性关系(P <0.05);Hoechst染色观察到细胞凋亡特点;Western blot结果显示,雷公藤红素组γ-H2AX表达增加,caspase-3被激活,PARP蛋白切割也明显增加;在加入ROS抑制剂NAC后,可逆转上述结果(P <0.05, P <0.01)。结论雷公藤红素可诱导肝癌细胞内ROS聚集,高水平的ROS引起细胞DNA损伤,最终诱导细胞凋亡。