小鼠胫骨不脱钙树脂包埋法的改良与应用
小鼠胫骨不脱钙树脂包埋法的改良与应用
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DOI：
10.12122/j.issn.1673-4254.2019.09.06
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发表时间：
2019
期刊：
影响因子：
--
通讯作者：
赵亮
中科院分区：
文献类型：
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作者：
邓仲豪;林锦德;聊哲霆;陈宇璠;吴德胜;冯舒皓;陈纳淳;赵宝红;赵亮
目的改良树脂包埋复数小鼠不脱钙胫骨的方法,提高树脂包埋法的效率及稳定性,探索减少树脂切片脱片的方法。方法取15只B6小鼠共30胫骨,标记、固定、脱水、渗透后将其包埋于直径4 mm的圆柱型树脂块中,胫骨近端1/4处切断后再对剩余的3/4胫骨包埋。在包埋时将5个胫骨切面贴于平整树脂板并包埋于同一树脂块中。分别在包埋液制备、切片、染色3个阶段随机将样本分为对照组及实验组,分别在3个改良组中采用以下方案处理,包括:向包埋液冲入CO_2;在切面上涂抹包埋液;在脱塑水化前以95 ℃加热切片15 min。分析树脂凝固时间、切片脱片率及骨形成、成骨细胞定量指标。结果成功包埋6个树脂块,每个树脂块内有5个胫骨,胫骨横截面于同一平面上,树脂块凝固完全,适于切片。向包埋液冲入CO_2可以缩短树脂块凝固时间,提高凝固成功率。在切面上涂抹包埋液可以显著降低切片时的脱片率(P0.05)。在脱塑前加热切片可以显著降低脱塑水化后的脱片率(P0.05)。结论复数小鼠不脱钙胫骨的树脂包埋改良法有效可行,这可能是一种理想的不脱钙骨组织研究方法。