Break-induced ATR and Ddb1-Cul4(Cdt)² ubiquitin ligase-dependent nucleotide synthesis promotes homologous recombination repair in fission yeast.
Break-induced ATR and Ddb1-Cul4(Cdt)² ubiquitin ligase-dependent nucleotide synthesis promotes homologous recombination repair in fission yeast.
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断裂诱导的 ATR 和 Ddb1-Cul4(Cdt)² 泛素连接酶依赖性核苷酸合成促进裂殖酵母中的同源重组修复。
作者：
J. Moss;Helen Tinline;Carol A. Walker;L. Folkes;M. Stratford;J. Hayles;K. Hoe;Dong;Han;S. Kearsey;O. Fleck;Christian Holmberg;O. Nielsen;T. Humphrey
核苷酸合成是对DNA损伤的普遍反应，但这种反应如何促进DNA修复和细胞存活尚不清楚。在这里，我们建立了一个作用，DNA损伤诱导的核苷酸合成同源重组（HR）修复裂殖酵母。使用遗传筛选，我们发现Ddb 1-Cul 4（Cdt）²泛素连接酶复合物和核糖核苷酸还原酶（RNR）是DNA双链断裂（DSB）的HR修复所需的。Ddb 1-Cul 4（Cdt）²泛素连接酶复合物是降解裂殖酵母中RNR抑制剂Spd 1所必需的。因此，缺失spd 1（+）抑制了DNA损伤敏感性和与ddb 1（+）或cdt 2（+）缺失相关的降低的HR效率。此外，我们证明了核苷酸合成的作用，在突触后间隙填充切除的ssDNA末端在HR修复。最后，我们定义了Rad 3（ATR）在核苷酸合成和HR中的作用，通过增加Cdt 2核水平来响应DNA损伤。我们的研究结果支持了一个模型，其中断裂诱导的Rad 3和Ddb 1-Cul 4（Cdt）²泛素连接酶依赖性Spd 1降解和RNR激活促进了HR修复过程中突触后ssDNA间隙填充。
Nucleotide synthesis is a universal response to DNA damage, but how this response facilitates DNA repair and cell survival is unclear. Here we establish a role for DNA damage-induced nucleotide synthesis in homologous recombination (HR) repair in fission yeast. Using a genetic screen, we found the Ddb1-Cul4(Cdt)² ubiquitin ligase complex and ribonucleotide reductase (RNR) to be required for HR repair of a DNA double-strand break (DSB). The Ddb1-Cul4(Cdt)² ubiquitin ligase complex is required for degradation of Spd1, an inhibitor of RNR in fission yeast. Accordingly, deleting spd1(+) suppressed the DNA damage sensitivity and the reduced HR efficiency associated with loss of ddb1(+) or cdt2(+). Furthermore, we demonstrate a role for nucleotide synthesis in postsynaptic gap filling of resected ssDNA ends during HR repair. Finally, we define a role for Rad3 (ATR) in nucleotide synthesis and HR through increasing Cdt2 nuclear levels in response to DNA damage. Our findings support a model in which break-induced Rad3 and Ddb1-Cul4(Cdt)² ubiquitin ligase-dependent Spd1 degradation and RNR activation promotes postsynaptic ssDNA gap filling during HR repair.
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影响因子：
16
作者：
Lee, Yang David;Wang, Jun;Stubbe, JoAnne;Elledge, Stephen J.
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Elledge, Stephen J.
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Tang, JY;Hwang, BJ;Chu, G
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Chu, G
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作者：
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Lisa C. Kadyk;Leland H. Hartwell
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Wolner, B;van Komen, S;Peterson, CL
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Sugawara, N;Wang, X;Haber, JE
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