Ultrastructural identification of uncoated caveolin-independent early endocytic vehicles.
Ultrastructural identification of uncoated caveolin-independent early endocytic vehicles.
复制标题
DOI：
10.1083/jcb.200407078
复制
发表时间：
2005-01-31
期刊：
影响因子：
--
通讯作者：
Parton RG
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Kirkham M;Fujita A;Chadda R;Nixon SJ;Kurzchalia TV;Sharma DK;Pagano RE;Hancock JF;Mayor S;Parton RG
利用定量光镜和改进的免疫电镜技术，我们表征了霍乱毒素结合亚基（CTB）在原代胚胎成纤维细胞中的进入途径。CTB在caveolin-1缺失（Cav1−/−）小鼠胚胎成纤维细胞（mef）和野生型（WT） mef中向高尔基复合体的转运是相同的。CTB进入Cav1−/−mef主要与网格蛋白和动力蛋白无关，但相对依赖胆固醇。免疫电子显微镜用于定量出芽和表面连接的小泡，并识别非小泡内吞载体。在WT mef中，有一小部分cav1阳性结构从质膜中萌发（每分钟2%），冈田酸或乳糖神经酰胺处理后出芽增加。然而，参与CTB初始进入的主要载体被确定为未涂覆的管状或环状结构。这些载体含有gpi锚定蛋白和液相标记物，代表了在WT和无小泡细胞中介导CTB摄取的主要载体。
Using quantitative light microscopy and a modified immunoelectron microscopic technique, we have characterized the entry pathway of the cholera toxin binding subunit (CTB) in primary embryonic fibroblasts. CTB trafficking to the Golgi complex was identical in caveolin-1null (Cav1−/−) mouse embryonic fibroblasts (MEFs) and wild-type (WT) MEFs. CTB entry in the Cav1−/− MEFs was predominantly clathrin and dynamin independent but relatively cholesterol dependent. Immunoelectron microscopy was used to quantify budded and surface-connected caveolae and to identify noncaveolar endocytic vehicles. In WT MEFs, a small fraction of the total Cav1-positive structures were shown to bud from the plasma membrane (2% per minute), and budding increased upon okadaic acid or lactosyl ceramide treatment. However, the major carriers involved in initial entry of CTB were identified as uncoated tubular or ring-shaped structures. These carriers contained GPI-anchored proteins and fluid phase markers and represented the major vehicles mediating CTB uptake in both WT and caveolae-null cells.
登录
查看更多内容
DOI：
10.1083/jcb.141.4.905
发表时间：
1998-05-18
期刊：
The Journal of cell biology
影响因子：
--
作者：
Orlandi PA;Fishman PH
通讯作者：
Fishman PH
突变动力蛋白的诱导特异性阻断内吞涂层囊泡的形成。
影响因子：
7.8
作者：
Damke, H;Baba, T;Warnock, D E;Schmid, S L
通讯作者：
Schmid, S L
影响因子：
7.8
作者：
Parton, R G;Joggerst, B;Simons, K
通讯作者：
Simons, K
DOI：
10.1083/jcb.131.1.69
发表时间：
1995-10
期刊：
The Journal of cell biology
影响因子：
--
作者：
Damke H;Baba T;van der Bliek AM;Schmid SL
通讯作者：
Schmid SL
影响因子：
11.8
作者：
Sabharanjak, S;Sharma, P;Mayor, S
通讯作者：
Mayor, S