人 GPC3 基因的原核表达及多克隆抗体的制备
人 GPC3 基因的原核表达及多克隆抗体的制备
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DOI：
10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2017-0379
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发表时间：
2017-11
期刊：
影响因子：
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通讯作者：
张富春
中科院分区：
文献类型：
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作者：
腾桥;夏丽洁;张富春
旨在构建人磷酯酰肌醇蛋白聚糖3（Glypican3，GPC3）原核蛋白，制备小鼠GPC3抗血清。扩增人GPC3基因cDNA的完整的开放阅读框，克隆至pET28a原核表达载体，在大肠杆菌BL21表达菌株中诱导表达磷酯酰肌醇蛋白聚糖融合蛋白，利用亲和层析的方法纯化his-融合蛋白，通过SDS-PAGE电泳检测蛋白的纯度，并测定蛋白含量；免疫Balb/c小鼠，制备抗血清。结果显示，成功制备了小鼠抗GPC3多克隆抗体，抗体滴度为1:51 200，经Western blot检查特异性良好。原核表达的重组人GPC3蛋