Guanine nucleotide exchange factors activate Rac1 in podocytes
Guanine nucleotide exchange factors activate Rac1 in podocytes
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鸟嘌呤核苷酸交换因子激活足细胞中的 Rac1
DOI：
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发表时间：
2018
期刊：
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通讯作者：
M. Maier
中科院分区：
文献类型：
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作者：
M. Maier
局灶节段性肾小球硬化（FSGS）是一种以足细胞损伤为特征的组织病理学病变，在此过程中，足细胞富含肌动蛋白的突起，称为足突，缩回（即消失）回细胞体。rhogtpase，如Rac1，有助于肌动蛋白细胞骨架的组织，体内动物研究和人类遗传学研究表明，Rac1活性过高会导致足突消失、蛋白尿（血液中的蛋白质渗漏到尿液中）和FSGS。虽然已知Rho鸟嘌呤核苷酸交换因子（gef）通常激活rhogptase，但尚不清楚是否有gef负责FSGS中的Rac1活性。本研究通过使用两种方法进行调查：候选方法和无偏方法。对培养的两行人足细胞进行rna测序，发现候选GEFs，然后分析与健康对照组相比，哪些GEFs上调了FSGS患者的mRNA；这让我们开始调查特里奥。三人基因敲除（KO）在培养的人足细胞中降低了Rac1活性、细胞大小、附着和运动性。此外，虽然促进肾小球硬化进展的促纤维化细胞因子转化生长因子1 （TGFB1）在对照细胞中增加了Rac1活性，但在Trio KOs中却降低了Rac1活性。这可能是由于同时激活了一种叫做Arhgap31的Rac1-GTPase激活蛋白（GAP）。此外，由基于接近度的BioID测定组成的无偏方法使我们研究了B-PIX。TGFB1增加了BioID和Rac1下拉分离的-PIX的数量。因此，总之，我们发现两个gef， Trio和B-PIX，有助于足细胞中Rac1的激活。%%%%肾小球硬化节段性病灶（FSGS）的病变特征：足细胞病变，足细胞活跃，足细胞突起，足细胞突起，足细胞突起，足细胞萎缩，足细胞收缩（c'est-a-dire 'effacent）。拉虽然些小蛋白Rho-GTPases,像Rac1, joue联合国作用行列式在l 'organisation du cytosquelette d 'actine et des练习曲动物体内et des练习曲在La genetique humaine suggerent, l 'hyperactivite Rac1 entraine联合国抹杀德派,一个proteinurie (fuite杜唱在l 'urine)一个FSGS。鸟嘌呤因子交换核苷酸（GEFs）是一种具有活性的蛋白质rho - gtp酶，它是一种具有rho - gtp酶活性的基因，是一种具有rho - gtp酶活性的基因。本文介绍了两种实用的方法：一种方法是公正的，一种方法是不可取的。GEF候选者可以通过对l'ARN进行测序来实现解耦，通过对足细胞人类培养物进行测序来实现解耦，通过对arn进行分析来实现解耦，通过对FSGS进行分析来实现解耦。cela noous a conduit a enqueter sur Trio。三组基因敲除（KO）使人足细胞的活性降低，细胞的活性降低，细胞的附着和运动活性降低。当然了，我的朋友们……
Focal segmental glomerulosclerosis (FSGS) is a histopathological lesion characterized by podocyte injury, during which the podocyte's actin-rich projections, called foot processes, retract (i.e. efface) back into the cell body. RhoGTPases, such as Rac1, contribute to the organization of the actin cytoskeleton and both in vivo animal studies and human genetics studies suggest that Rac1 hyperactivity leads to foot process effacement, proteinuria (the leakage of protein from blood into the urine), and FSGS. While Rho guanine nucleotide exchange factors (GEFs) are typically known for activating RhoGPTases, it remains unclear if any GEFs are responsible for Rac1 activity in FSGS. This study investigates this by using two methods: a candidate and an unbiased approach. Candidate GEFs were discovered using RNA-sequencing on two lines of cultured human podocytes, followed by analysis of which GEFs have upregulated mRNA in humans with FSGS compared to healthy control; this led us to investigate Trio. Trio knockout (KO) in cultured human podocytes decreased Rac1 activity, cell size, attachment, and motility. Furthermore, while the profibrotic cytokine that contributes to glomerulosclerosis progression, transforming growth factor 1 (TGFB1), increases Rac1 activity in control cells, it decreases Rac1 activity in Trio KOs. This may due to simultaneous activation of a Rac1-GTPase activation protein (GAP) called Arhgap31. Additionally, the unbiased approach, which consisted of the proximity-based BioID assay, led us to study B-PIX. TGFB1 increases the amount of -PIX isolated by BioID and by pulldown with Rac1. Thus, in conclusion, we have found that two GEFs, Trio and B-PIX, contribute to the Rac1 activation in podocytes. %%%%La glomerulosclerose segmentaire focale (FSGS) est une maladie renale caracterisee par une lesion des podocytes, au cours de laquelle les projections riches en actine du podocyte, appelees processus du pied, se retractent (c'est-a-dire s'effacent) dans le corps cellulaire. La famille des petites proteines Rho-GTPases, comme Rac1, joue un role determinant dans l'organisation du cytosquelette d'actine et des etudes animales in vivo et des etudes sur la genetique humaine suggerent que l'hyperactivite Rac1 entraine un effacement du pied, une proteinurie (fuite du sang dans l'urine) et une FSGS. Alors que les proteines guanine facteurs d'echange nucleotidique (GEFs) sont connues pour activer les proteines Rho-GTPases, il n'est pas clair si des GEFs sont responsables de l'activite Rac1 dans FSGS. Cette presente examine cela en utilisant deux methodes: un candidat et une approche impartiale. Les GEF candidats ont ete decouverts en utilisant le sequencage de l'ARN sur deux lignees de podocytes humains cultives, suivi par l'analyse des ARNm de GEFs qui sont regules a la hausse chez les humains avec la FSGS; cela nous a conduit a enqueter sur Trio. Le knockout du trio (KO) dans les podocytes humains cultives a diminue l'activite de Rac1, la taille des cellules, l'attachement et la motilite. En outre, alors que la…