Kristalle in Minutenschnelle: Sofortige Mikrokristallisation verschiedenster Varianten der CYP102A1‐(P450BM3)‐Hamdomane
Kristalle in Minutenschnelle: Sofortige Mikrokristallisation verschiedenster Varianten der CYP102A1‐(P450BM3)‐Hamdomane
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Minutenschnelle 中的水晶:Sofortige Mikrokristallization verschiedenster Varianten der CYP102A1-(P450BM3)-Hamdomane
DOI:
10.1002/ange.201913407
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发表时间:
2020
期刊:
影响因子:
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通讯作者:
O. Shoji
中科院分区:
文献类型:
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作者:
J. K. Stanfield;K. Omura;A. Matsumoto;C. Kasai;H. Sugimoto;Y. Shiro;Y. Watanabe;O. Shoji
Die Kristallisation der Hämdomäne von CYP102A1 (P450BM3) kann nach Modifizierung eine Herausforderung sein. Dennoch sind solche Kristallstrukturen unentbehrlich für die wirksame strukturbezogene Entwicklung von P450BM3 als Biokatalysator. Es wurde gezeigt, dass das AbietanditerpenderivatN‐Abietoyl‐l‐tryptophan (AbiATrp) ein hervorragender Kristallisationsbeschleuniger ist. Die Nutzung von Kristallen der P450BM3‐Hämdomäne mit AbiATrp als Impfkristalle ermöglichte die rasche Mikrokristallisation bei der naszierende Kristalle innerhalb von Sekunden nach Impfung erschienen. Hierdurch wurde eine Auswahl an Kristallen der P450BM3‐Hämdomäne erhalten, die bisher nicht kristallisierbare Täuschmoleküle, diverse künstliche Metalloporphyrine, welche verschiedenartige Liganden binden, sowie zusätzlich stark getaggte Hämdomänevarianten enthalten (37 zusätzliche Aminosäuren). Manche der Strukturen könnten als Modellverbindungen verschiedener Stadien des katalytischen Zyklus von P450BM3 genutzt werden.