利用CRISPRCas9技术构建Mex3c基因缺陷小鼠模型
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期刊：
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通讯作者：
李婷
中科院分区：
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作者：
霍泉;杜勇;杨玲玲;孙东君;李婷
目的 利用CRISPR/Cas9技术敲除FVB小鼠基因链中的Mex3c基因，为进行相关研究提供Mex3c基因缺陷小鼠模型。方法 利用CRISPR/Cas9基因编辑技术，针对性设计Mex3c基因1-2外显子sgRNA,将小鼠mex3c基因的gRNA和Cas9 mRNA共注射到受精卵中，产生目标基因敲除子代，待小鼠出生3周后剪鼠尾提取DNA并进行PCR鉴定，所获F0代杂合小鼠继续与野生型小鼠合笼繁殖获取F1、F2代小鼠，剪取组织提取DNA鉴定分离杂合体小鼠。结果 获得了6只Mex3c基因杂合突变的F0代小鼠，F1代共20只雌性杂合小鼠，F2代24只雌性杂合小鼠，能够稳定遗传Mex3c缺陷基因。基因组测序结果显示获得正确敲除的杂合子。结论 成功获得Mex3c基因缺陷的FVB小鼠，为研究不同能量代谢条件下的子代鼠胚神经管发生发育提供了重要工具。