GH蛋白诱导鸡原代成肌细胞表达IGF1条件优化
GH蛋白诱导鸡原代成肌细胞表达IGF1条件优化
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DOI：
10.3969/j.issn.1674-7968.2017.03.018
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发表时间：
2017
期刊：
影响因子：
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通讯作者：
安立龙
中科院分区：
文献类型：
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作者：
张丽;王章;李婷;徐海冬;效梅;刘满清;聂庆华;张细权;安立龙
生长激素(growth hormone, GH)具有促进动物生长发育的作用,其通过内分泌系统与生长激素受体(growth hormone receptor, GHR)结合形成GH-GHR-IGF1信号通路,在组织和器官发育过程中发挥功能。胰岛素样生长因子1(insulin-like growth factor 1, IGF1)是一种生长调节多肽,对动物的生长发育和生理调节有重要作用。为了确定体外培养条件下GH诱导鸡成肌细胞表达IGF1的最佳添加方式和浓度,本实验通过分离培养鸡(Gallus gallus)原代成肌细胞,研究GH对下游IGF1 mRNA和蛋白质表达的影响。实验选用孵化至11胚龄的鸡胚,在无菌条件下分离其腿肌组织,通过机械法和差速贴壁法分离纯化获得鸡原代成肌细胞。在此基础上,分别在有血清和血清饥饿条件下,在培养液中添加不同浓度的GH (50, 100, 200和500 ng/mL)诱导培养3 h,收获细胞,定量分析IGF1的表达变化。结果表明,体外培养条件下GH可以诱导鸡成肌细胞表达IGF1 mRNA和蛋白质。在相同的GH添加浓度下,IGF1在血清饥饿条件下的表达量高于有血清培养条件。尤其是在200 ng/mL添加浓度下,IGF1表达量极显著高于有血清培养条件。研究结果表明,在血清饥饿培养条件下,200 ng/mL GH能够诱导鸡原代成肌细胞表达IGF1的量达到最高水平。本研究的开展为揭示GH-GHR-IGF1通路调控鸡成肌细胞增殖和分化的机制提供了理论依据,为研究肉鸡骨骼肌发育提供了基本数据和资料。