Simultaneous FRAP, FLIM and FAIM for measurements of protein mobility and interaction in living cells.
Simultaneous FRAP, FLIM and FAIM for measurements of protein mobility and interaction in living cells.
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同时 FRAP、FLIM 和 FAIM 用于测量活细胞中的蛋白质迁移率和相互作用。
作者：
J. Levitt;P. Morton;G. Fruhwirth;G. Santis;P. Chung;M. Parsons;K. Suhling
我们提出了一种新的集成多模态荧光显微镜技术，用于光漂白后的荧光恢复（FRAP），荧光寿命成像（FLIM）和荧光各向异性成像（FAIM）。这种方法在FRAP恢复期间捕获一系列偏振分辨荧光寿命图像，最大化从有限的光子预算中获得的信息。我们已经应用这种方法来分析的行为，绿色荧光蛋白标记的柯萨奇病毒和腺病毒受体（CAR）在活的人上皮细胞。我们的数据显示，CAR在整个细胞中以寡聚状态存在，并且这些复合物与细胞-细胞连接处的受体的高固定部分一起发生。这些发现揭示了完整细胞中CAR受体之间先前未知的分子关联，并证明了FRAP，FLIM和FAIM显微镜组合作为分析活细胞中复杂多组分动力学的强大方法的能力。
We present a novel integrated multimodal fluorescence microscopy technique for simultaneous fluorescence recovery after photobleaching (FRAP), fluorescence lifetime imaging (FLIM) and fluorescence anisotropy imaging (FAIM). This approach captures a series of polarization-resolved fluorescence lifetime images during a FRAP recovery, maximizing the information available from a limited photon budget. We have applied this method to analyse the behaviour of GFP-labelled coxsackievirus and adenovirus receptor (CAR) in living human epithelial cells. Our data reveal that CAR exists in oligomeric states throughout the cell, and that these complexes occur in conjunction with high immobile fractions of the receptor at cell-cell junctions. These findings shed light on previously unknown molecular associations between CAR receptors in intact cells and demonstrate the power of combined FRAP, FLIM and FAIM microscopy as a robust method to analyse complex multi-component dynamics in living cells.
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影响因子：
3.4
作者：
Sherman, Eilon;Itkin, Anna;Haran, Gilad
通讯作者：
Haran, Gilad
影响因子：
5.7
作者：
van Raaij, MJ;Chouin, E;Cusack, S
通讯作者：
Cusack, S
同时测量荧光寿命、各向异性和 FRAP 恢复曲线
DOI：
10.1117/12.875151
发表时间：
2011
期刊：
--
影响因子：
--
作者：
Levitt J
通讯作者：
Levitt J
影响因子：
15
作者：
Kuimova, Marina K.;Yahioglu, Gokhan;Ogilby, Peter R.
通讯作者：
Ogilby, Peter R.
当一加一不等于二时：聚集体和多重标记蛋白质中的荧光各向异性。
影响因子：
3.4
作者：
Zolmajd-Haghighi Z
通讯作者：
Zolmajd-Haghighi Z