斑马鱼早期胚胎发育过程中IL-10表达的特点
斑马鱼早期胚胎发育过程中IL-10表达的特点
复制标题
DOI：
--
复制
发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
--
通讯作者：
舒莉萍
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
赵砚驰;李化;李丹;孔鹏;张乙进;吴洁玲;莫大双;舒莉萍
目的 探讨野生型斑马鱼白细胞介素10（IL-10）在胚胎早期发育过程中的表达特点。方法 在美国国家生物信息技术中心（NCBI）数据库中分别查询人类、小鼠及斑马鱼染色体中IL-10的基因位置，与Ensemble数据库中的数据进行比对，采用软件分子进化遗传分析软件（MEGA X）绘制系统进化树；收集3组72受精后小时（hpf）斑马鱼胚胎、30枚/组，提取总RNA（Total RNA）及合成互补脱氧核糖核酸（cDNA），构建斑马鱼重组质粒pCS2+-IL-10，体外转录合成地高辛标记的IL-10反义RNA探针；分别收集4、6、9、12、18、24、48及72 hpf的斑马鱼胚胎75枚（25枚/组、3组），采用全胚胎原位杂交技术检测斑马鱼胚胎不同发育时间点IL-10表达及分布情况。结果 野生型斑马鱼IL-10基因与人类IL-10基因相似度较高，且在进化过程中相对保守；限制性内切酶双酶切重组质粒及测序结果显示，重组质粒构建无误；全胚胎原位杂交结果显示，4～12 hpf野生型斑马鱼胚胎中未观察到阳性杂交信号，18 hpf野生型斑马鱼胚胎中后部中间细胞群观察到IL-10阳性杂交信号，24～72 hpf野生型斑马鱼胚胎胚胎头部区域IL-10广泛表达，头部背侧、心脏、眼眶以及卵黄囊背侧部位的信号尤为明显。结论 斑马鱼IL-10在进化过程中具有相对保守性，在早期胚胎发育过程中IL-10有不同程度的表达，提示IL-10在斑马鱼胚胎早期发育中发挥重要作用。