活血定眩胶囊含药血清对小鼠脑微血管内皮细胞bEnd.3细胞自噬的干预研究
活血定眩胶囊含药血清对小鼠脑微血管内皮细胞bEnd.3细胞自噬的干预研究
复制标题
DOI：
--
复制
发表时间：
2019
期刊：
影响因子：
--
通讯作者：
宋敏
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
董平;侯红燕;黄凯;董万涛;巩彦龙;宋敏
目的 探讨活血定眩胶囊含药血清对乏氧培养 bEnd.3细胞自噬的干预情况。方法 除正常组外，将细胞乏氧培养建立氧糖剥夺 ( OGD) 模型，设置 0，3， 6 和 9 h 不同时间段模型。用 CCK8 检测不同时间段细胞活性，用 GFP－LC3 转 染，细胞免疫 荧 光 检 测 4 个 时 间 段 bEnd. 3 细胞微管相关蛋白 1 轻 链 3B.(LC3Ⅱ) 表达情况，以明确细胞自噬最佳时间段; 然后将 bEnd. 3 细胞分为 6 组: 正常组、模型组、对照组和高、中、低 3 个浓度实验组，在 6 h 后，高、中、低 3个浓度实验组分别加入 3 个百分含量( 15% ，10% ，5% ) 的活血定眩胶囊含药血清，对照组加入氟桂利嗪 32 μmol·L － 1。用免疫印迹法检测各组 bEnd. 3 细胞的 LC3Ⅱ、自噬重要调控因子 Beclin － 1 和泛素结合蛋白 P62( P62) 蛋白的表达水平。结果 在上述 4 个时间点的细胞存活率分别为( 100. 00 ± 0. 00) % ， ( 86. 00 ± 2. 41) % ，( 60. 00 ± 2. 31) % 和( 35. 00 ± 3. 35) % ; bEnd. 3 细胞在乏氧培养 6 h 后 LCⅡ含量较高，空白组、模型组和中剂量实验组的 LC3B － Ⅱ相对表达量分别为 1. 01 ± 0. 03，1. 84 ± 0. 02 和 2. 00 ± 0. 01; 这 3 组的 Bcline － 1 相对表达量为 0. 27 ± 0. 01，0. 39 ± 0. 01 和 0. 43 ± 0. 01; 这 3 组的 P62 相对表达量分别为 0. 47 ± 0. 01，0. 38 ± 0. 01 和 0. 35 ± 0. 01。上述指标: 模型组与空白组相比，差异均有统计学意义( 均 P ＜ 0. 05) ; 中剂量实验组与模型组相比，差异均有统计学意义( 均P ＜ 0. 05) 。结论 活血定眩胶囊含药血清通过调控多个蛋白表达水平来促进适度自噬，调节血管内皮功能。