3D reconstruction of the glycocalyx structure in mammalian capillaries using electron tomography.
3D reconstruction of the glycocalyx structure in mammalian capillaries using electron tomography.
复制标题
DOI：
10.1111/j.1549-8719.2012.00168.x
复制
发表时间：
2012-05
期刊：
影响因子：
--
通讯作者：
Squire JM
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Arkill KP;Neal CR;Mantell JM;Michel CC;Qvortrup K;Rostgaard J;Bates DO;Knupp C;Squire JM
利用传统的透射电子显微镜技术观察小血管管腔中构成糖萼的分子链已被证明是困难的。从组织中以各种方式染色获得的图像显示了糖萼层蛋白多糖组分的组织规律（基本间距约20 nm），但需要大量样品。试图可视化糖萼的正面（即垂直于管腔内皮细胞层的方向，直接适用于渗透性建模）的成功有限（例如冻结断裂）。因此，需要一种新的方法。在这里，我们展示了使用相对新颖的3D电子断层扫描电子显微镜技术对两种不同染色的制备的有效性，以揭示内皮细胞层上方糖萼结构的细节。一种制备方法使用了新的染色技术，使用镧镝糖胺聚糖粘附（LaDy GAGa方法）。
Visualising the molecular strands making up the glycocalyx in the lumen of small blood vessels has proved to be difficult using conventional transmission electron microscopy techniques. Images obtained from tissue stained in a variety of ways have revealed a regularity in the organisation of the proteoglycan components of the glycocalyx layer (fundamental spacing about 20 nm), but require a large sample number. Attempts to visualise the glycocalyx face-on (i.e. in a direction perpendicular to the endothelial cell layer in the lumen and directly applicable for permeability modelling) has had limited success (e.g. freeze fracture). A new approach is therefore needed. Here we demonstrate the effectiveness of using the relatively novel electron microscopy technique of 3D electron tomography on two differently stained preparations to reveal details of the architecture of the glycocalyx just above the endothelial cell layer. One preparation uses the novel staining technique using Lanthanum Dysprosium Glycosamino Glycan adhesion (the LaDy GAGa method).
登录
查看更多内容
DOI：
10.1083/jcb.200905103
发表时间：
2009-10-05
期刊：
The Journal of cell biology
影响因子：
--
作者：
Pigino G;Geimer S;Lanzavecchia S;Paccagnini E;Cantele F;Diener DR;Rosenbaum JL;Lupetti P
通讯作者：
Lupetti P
影响因子：
2.2
作者：
LUTHER, PK;LAWRENCE, MC;CROWTHER, RA
通讯作者：
CROWTHER, RA
影响因子：
2
作者：
ROSTGAARD, J;QVORTRUP, K;POULSEN, SS
通讯作者：
POULSEN, SS
影响因子：
20.1
作者：
Vink, H;Duling, BR
通讯作者：
Duling, BR
影响因子：
3
作者：
Kremer, JR;Mastronarde, DN;McIntosh, JR
通讯作者：
McIntosh, JR