Effect of methyl mercaptan on synthesis and degradation of collagen.
Effect of methyl mercaptan on synthesis and degradation of collagen.
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甲硫醇对胶原合成和降解的影响。
DOI：
10.1111/j.1600-0765.1996.tb00499.x
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发表时间：
1996
影响因子：
3.5
通讯作者：
Tonzetich,J
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Johnson,P;Yaegaki,K;Tonzetich,J
测量[14 C]-脯氨酸转化为[14 C]-羟脯氨酸，以评估甲基精氨酸对人牙龈成纤维细胞培养物中胶原蛋白的细胞内和细胞外代谢的影响。在30分钟脉冲后，每毫升95%空气/5% CO2中加入10 ng甲基苯丙胺，顶空抑制胶原蛋白合成39%，并使新合成胶原蛋白的细胞内降解从26%增加到42%。测定脯氨酸转运的平行培养物显示对[14C]-脯氨酸摄取的抑制率为29%。对暴露于甲基强的松龙12 h的培养物进行的类似分析显示，细胞内降解增加（20%对照vs. 30%试验），细胞外胶原溶解显著增加（4%对照vs. 55%试验）。脉冲期间，胶原蛋白合成减少了39%。平板凝胶电泳也表明，甲基强的松龙处理引起成熟的Ⅰ型胶原α，α 2链和Ⅲ型前胶原减少。通过胃蛋白酶消化确认前胶原种类的身份。逆转录聚合酶链反应被用来比较表达的α 1链的I型前胶原与III型前胶原，并表示抑制mRNA合成的III型前胶原在文化中暴露于甲基精氨酸。
Measurements of the conversion of [14C]‐proline to [14C]‐hydroxyproline were employed to assess the effect of methyl mercaptan on intra‐ and extracellular metabolism of collagenous proteins in human gingival fibroblast cultures. Following a 30‐min pulse, 10 ng of methyl mercaptan per ml of 95% air/5% CO2, headspace suppressed collagen synthesis by 39% and increased the intracellular degradation of newly synthesized collagen from 26% to 42%. Parallel cultures assayed for proline transport demonstrated a 29% inhibition of [14C]‐proline uptake. A similar analysis of cultures exposed to methyl mercaptan for 12 h revealed an increase in intracellular degradation (20% control vs. 30% test) and a marked increase in extracellular collagenolysis (4% control vs. 55% test). While pulsing, collagen synthesis was decreased by 39%. Slab gel electrophoresis also demonstrated that treatment with methyl mercaptan caused reductions both in mature a, and α2chains of type I collagen and in type III procollagen. Identities of the procollagen species were confirmed by pepsin digestion. Reverse transcribed polymerase chain reaction was utilized to compare expression of a1 chains of type I procollagen with type III procollagen and indicated suppression of mRNA synthesis for type III procollagen in cultures exposed to methyl mercaptan.
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