Orthogonal gene knockout and activation with a catalytically active Cas9 nuclease.
Orthogonal gene knockout and activation with a catalytically active Cas9 nuclease.
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DOI：
10.1038/nbt.3390
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发表时间：
2015-11
影响因子：
46.9
通讯作者：
Konermann S
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Dahlman JE;Abudayyeh OO;Joung J;Gootenberg JS;Zhang F;Konermann S
我们开发了一种基于 CRISPR 的方法，使用具有催化活性的 Cas9 和不同的 sgRNA 构建体来敲除并激活同一细胞中的不同基因。这些 sgRNA 具有 14 15 bp 靶序列和 MS2 结合环，可以使用活性 Cas9 核酸酶激活基因表达，而不诱导 DSB。我们使用这些“死RNA”在人类细胞中进行正交基因敲除和转录激活。
We have developed a CRISPR-based method that uses catalytically active Cas9 and distinct sgRNA constructs to knock out and activate different genes in the same cell. These sgRNAs, with 14 15 bp target sequences and MS2 binding loops, can activate gene expression using an active Cas9 nuclease, without inducing DSBs. We use these ‘dead RNAs’ to perform orthogonal gene knockout and transcriptional activation in human cells.