Genetically encoded tetrazine amino acid directs rapid site-specific in vivo bioorthogonal ligation with trans-cyclooctenes.
Genetically encoded tetrazine amino acid directs rapid site-specific in vivo bioorthogonal ligation with trans-cyclooctenes.
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DOI：
10.1021/ja2109745
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发表时间：
2012-02-15
影响因子：
15
通讯作者：
Mehl, Ryan A.
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Seitchik, Jason L.;Peeler, Jennifer C.;Taylor, Michael T.;Blackman, Melissa L.;Rhoads, Timothy W.;Cooley, Richard B.;Refakis, Christian;Fox, Joseph M.;Mehl, Ryan A.
对于没有催化剂的定点标记蛋白质，需要反应速度更快、成分更少的生物正交连接方法。目前还没有结合快速反应速度和稳定、无毒、化学选择性试剂的体内蛋白质定位标记的通用方法。为了克服这些限制，我们开发了一种含有四嗪的氨基酸1，它在活细胞内稳定。我们已经对这种独特的氨基酸进行了定点基因编码，以响应琥珀密码子，允许在蛋白质的任何位置放置一个单独的1。我们已经证明，在体外和体内，含有1的蛋白质可以连接到构象紧张的反式环辛烯2上，反应速度比最常用的标记方法快得多。
Bioorthogonal ligation methods with improved reaction rates and less obtrusive components are needed for site-specifically labeling proteins without catalysts. Currently no general method exists for in vivo site-specific labeling of proteins that combines fast reaction rate with stable, nontoxic and chemoselective reagents. To overcome these limitations we have developed a tetrazine-containing amino acid, 1, that is stable inside living cells. We have site-specifically genetically encoded this unique amino acid in response to an amber codon allowing a single 1 to be placed at any location in a protein. We have demonstrated that protein containing 1 can be ligated to a conformationally strained trans-cyclooctene, 2, in vitro and in vivo with reaction rates significantly faster than most commonly used labeling methods.
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影响因子：
15
作者：
Halo TL;Appelbaum J;Hobert EM;Balkin DM;Schepartz A
通讯作者：
Schepartz A
影响因子：
15
作者：
Blackman, Melissa L.;Royzen, Maksim;Fox, Joseph M.
通讯作者：
Fox, Joseph M.
影响因子：
16.6
作者：
Devaraj, Neal K.;Upadhyay, Rabi;Hatin, Jered B.;Hilderbrand, Scott A.;Weissleder, Ralph
通讯作者：
Weissleder, Ralph
影响因子：
2.9
作者：
Miyake-Stoner, Shigeki J.;Refakis, Christian A.;Mehl, Ryan A.
通讯作者：
Mehl, Ryan A.
DOI：
10.1039/c0cc03078c
发表时间：
2010-11-14
期刊：
Chemical communications (Cambridge, England)
影响因子：
--
作者：
Li Z;Cai H;Hassink M;Blackman ML;Brown RC;Conti PS;Fox JM
通讯作者：
Fox JM