Cell-type specific expression of a dominant negative PKA mutation in mice.
Cell-type specific expression of a dominant negative PKA mutation in mice.
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DOI：
10.1371/journal.pone.0018772
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发表时间：
2011-04-12
期刊：
影响因子：
3.7
通讯作者：
McKnight GS
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Willis BS;Niswender CM;Su T;Amieux PS;McKnight GS
我们利用 Cre 重组酶/loxP 系统创建了一个小鼠系，其中任何表达 Cre 重组酶的细胞类型中的 PKA 活性都可以被抑制。该小鼠品系携带突变型 Prkar1a 等位基因，编码羧基端 cAMP 结合域（位点 B）第 324 位处的甘氨酸至天冬氨酸取代。该突变产生显性失活 RIα 调节亚基 (RIαB)，并导致 PKA 活性受到抑制。在位点 B 突变之前的内含子中插入 loxP 侧翼的新霉素盒可防止突变 RIαB 等位基因的表达，直到发生 Cre 介导的盒切除。表达 RIαB 的胚胎干细胞表现出 PKA 活性降低和 cAMP 反应性基因表达抑制。在肝细胞中表达 RIαB 的小鼠表现出 PKA 活性降低、禁食诱导的基因表达正常以及葡萄糖处理增强。体内 RIαB 等位基因的激活为分析 PKA 生理学功能提供了一个新的系统。
We employed the Cre recombinase/loxP system to create a mouse line in which PKA activity can be inhibited in any cell-type that expresses Cre recombinase. The mouse line carries a mutant Prkar1a allele encoding a glycine to aspartate substitution at position 324 in the carboxy-terminal cAMP-binding domain (site B). This mutation produces a dominant negative RIα regulatory subunit (RIαB) and leads to inhibition of PKA activity. Insertion of a loxP-flanked neomycin cassette in the intron preceding the site B mutation prevents expression of the mutant RIαB allele until Cre-mediated excision of the cassette occurs. Embryonic stem cells expressing RIαB demonstrated a reduction in PKA activity and inhibition of cAMP-responsive gene expression. Mice expressing RIαB in hepatocytes exhibited reduced PKA activity, normal fasting induced gene expression, and enhanced glucose disposal. Activation of the RIαB allele in vivo provides a novel system for the analysis of PKA function in physiology.
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DOI：
10.1073/pnas.97.12.6433
发表时间：
2000-06-06
影响因子：
11.1
作者：
Desseyn, JL;Burton, KA;McKnight, GS
通讯作者：
McKnight, GS
影响因子：
4.8
作者：
Amieux, PS;Cummings, DE;McKnight, GS
通讯作者：
McKnight, GS
影响因子：
5.3
作者：
MATTHEWS, RP;GUTHRIE, CR;MCKNIGHT, GS
通讯作者：
MCKNIGHT, GS
影响因子：
30.8
作者：
Kirschner, LS;Carney, JA;Stratakis, CA
通讯作者：
Stratakis, CA
影响因子：
64.8
作者：
Cummings, DE;Brandon, EP;McKnight, GS
通讯作者：
McKnight, GS