DENV-2作用于HUVECs和人巨噬细胞对黏附分子表达的影响
DENV-2作用于HUVECs和人巨噬细胞对黏附分子表达的影响
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DOI：
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发表时间：
2019
期刊：
影响因子：
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通讯作者：
来涛
中科院分区：
文献类型：
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作者：
罗玉;左丽;来涛
目的:研究登革2型病毒(DENV-2)感染人脐静脉内皮细胞(HUVECs)和人巨噬细胞,且感染后共培养对主.要黏附分子表达的影响。 方法:水平密度梯度离心法提取浓缩白细胞中的外周血单核细胞(PBMC),贴壁分离单核细胞,用巨.噬细胞集落刺激因子(M鄄CSF)刺激 5 ~ 7 d,流式细胞术鉴定细胞表面 CD14 和 CD11b 分子。 用 10.3.TCID50 DENV-2 分别感染HUVECs 和人巨噬细胞,且感染后两者共培养,qRT-PCR 检测细胞内不同时间点 DENV NS1、VCAM-1、ICAM-1 和 E-selectin.mRNA 相对表达量。 双抗体夹心 ELISA 法分别检测不同时间点各组培养上清液中可溶性分子 ICAM-1、VCAM-1 和 E-selectin.的表达水平变化。 结果:流式细胞术鉴定人巨噬细胞纯度为92.15% 。 DENV-2 感染 HUVECs 后病毒基因 NS1 的相对.表达量呈先升后降趋势,在 24 h 达到峰值后下降,DENV-2 感染人巨噬细胞的 DENV NS1 基因相对表达量呈先递减后增加趋.势,共培养组 HUVECs 的 NS1 mRNA 各时间点表达水平均高于 HUVECs 单独感染组。 DENV-2 感染巨噬细胞后,ICAM-1.mRNA 相对表达量于 4、8 h 高于巨噬细胞未感染组,12、24、48、72 h 相对表达水平与未感染组相比差异无统计学意义;E鄄.selectin mRNA 相对表达量于 4 h 明显高于巨噬细胞未感染组,8 h 与未感染组相比表达量无统计学意义差异,12、24、48、72 h.与未感染组相比表达量下调;但未检测到 VCAM-1 mRNA 的表达。 共培养组 HUVECs 的 ICAM-1 和 VCAM-1 mRNA 相对表达.量与 HUVECs 单独感染组相比 8 h 后均上调,且均在 24 h 达峰值。 感染后的 HUVECs E-selectin mRNA 于 4 h 表达水平最高,.且各组相对表达量均低于共培养组。 共培养组中感染 DENV鄄2 的 HUVECs 培养上清液中 ICAM鄄1 表达量均高于 HUVECs 单独.感染组;共培养组中感染 DENV-2 的 HUVECs 中 E-selectin 表达量随时间呈先增后降趋势,且在 24 h 表达量达峰值;但未检测.到培养上清液中 VCAM-1 的表达。 结论:DENV-2 能在 HUVECs 和人巨噬细胞中复制且能激活内皮细胞,被 DENV-2 感染的巨.噬细胞能增强被感染的 HUVECs 的细胞活化并增加其黏附分子的表达。