Distances between the b-subunits in the tether domain of F(0)F(1)-ATP synthase from E. coli.
Distances between the b-subunits in the tether domain of F(0)F(1)-ATP synthase from E. coli.
复制标题
大肠杆菌 F(0)F(1)-ATP 合酶系链结构域中 b 亚基之间的距离。
DOI：
10.1016/j.bbabio.2005.03.013
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发表时间：
2005
期刊：
影响因子：
--
通讯作者：
M. Huber
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
S. Steigmiller;M. Börsch;P. Gräber;M. Huber
E.用自旋标记EPR技术对大肠杆菌进行了定点突变研究。F0 F1-ATP脱氢酶将质子转运与从ADP和磷酸合成ATP偶联。亲水性F1-部分和疏水性膜整合的F0-部分通过中心柄和外围柄连接。外周柄由两个b亚基组成。在b亚基的系链结构域的B-40、B-51、B-53、B-62或B-64处引入半胱氨酸突变，并用氮氧自旋标记物标记。常规（9 GHz），高场（95 GHz）和脉冲EPR光谱显示：所有的残留物都在一个相对极性的环境中，与流动性一致的螺旋网站。在每个b-亚基的自旋标记之间的距离是2.9 nm，在每个突变体，揭示了两个螺旋的平行排列。它们可以对齐，但分开很大的距离（1.9 nm），或紧密接触，并沿螺旋轴移位沿着最大2.7 nm，这排除了先前为b亚基提出的对齐卷曲螺旋模型。与不存在核苷酸的情况相比，不可水解的核苷酸AMPPNP与自旋标记的酶的结合对距离没有显著影响。
The arrangement of the b-subunits in the holo-enzyme F0F1-ATP synthase from E. coli is investigated by site-directed mutagenesis spin-label EPR. F0F1-ATP synthases couple proton translocation with the synthesis of ATP from ADP and phosphate. The hydrophilic F1-part and the hydrophobic membrane-integrated F0-part are connected by a central and a peripheral stalk. The peripheral stalk consists of two b-subunits. Cysteine mutations are introduced in the tether domain of the b-subunit at b-40, b-51, b-53, b-62 or b-64 and labeled with a nitroxide spin label. Conventional (9 GHz), high-field (95 GHz) and pulsed EPR spectroscopy reveal: All residues are in a relatively polar environment, with mobilities consistent with helix sites. The distance between the spin labels at each b-subunit is 2.9 nm in each mutant, revealing a parallel arrangement of the two helices. They can be in-register but separated by a large distance (1.9 nm), or at close contact and displaced along the helix axes by maximally 2.7 nm, which excludes an in-register coiled-coil model suggested previously for the b-subunit. Binding of the non-hydrolysable nucleotide AMPPNP to the spin-labeled enzyme had no significant influence on the distances compared to that in the absence of nucleotides.
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影响因子：
3.4
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通讯作者：
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DOI：
10.1016/s0005-2728(98)00048-6
发表时间：
1998-06
期刊：
Biochimica et biophysica acta
影响因子：
--
作者：
S. Wilkens;R. Capaldi
通讯作者：
S. Wilkens;R. Capaldi
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DOI：
--
发表时间：
1993
期刊：
The Journal of biological chemistry
影响因子：
--
作者：
McCormick,KA;Deckers-Hebestreit,G;Altendorf,K;Cain,BD
通讯作者：
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DOI：
10.1073/pnas.92.24.10964
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CROSS, RL
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