In situ proteolysis for protein crystallization and structure determination

In situ proteolysis for protein crystallization and structure determination
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DOI:
10.1038/nmeth1118
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发表时间:
2007-12-01
期刊:
影响因子:
48
通讯作者:
Edward, Aled M.
Edward, Aled M.
中科院分区:
生物学1区
文献类型:
--
作者:
Dong, Aiping;Xu, Xiaohui;Edward, Aled M.

文献摘要

被引文献

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我们测试了原位蛋白水解的一般适用性,通过在 55 种细菌和 14 种人类蛋白质的结晶试验中添加蛋白酶(胰凝乳蛋白酶或胰蛋白酶)消化步骤来形成适合结构测定的蛋白质晶体,这些蛋白质已被证明与我们在结晶或结构测定方面的最大努力相悖。这是一项正在进行的工作;到目前为止,我们确定了 9 种细菌蛋白和人氨基咪唑核糖核苷酸合成酶 (AIRS) 结构域的结构。
We tested the general applicability of in situ proteolysis to form protein crystals suitable for structure determination by adding a protease (chymotrypsin or trypsin) digestion step to crystallization trials of 55 bacterial and 14 human proteins that had proven recalcitrant to our best efforts at crystallization or structure determination. This is a work in progress; so far we determined structures of 9 bacterial proteins and the human aminoimidazole ribonucleotide synthetase (AIRS) domain.