Photocleavable DNA barcode-antibody conjugates allow sensitive and multiplexed protein analysis in single cells.

Photocleavable DNA barcode-antibody conjugates allow sensitive and multiplexed protein analysis in single cells.
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可光透明的DNA条形码 - 抗体结合物可以在单个细胞中敏感和多重蛋白质分析。

DOI:
10.1021/ja307689w
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发表时间:
2012-11-14
影响因子:
15
通讯作者:
Weissleder, Ralph
Weissleder, Ralph
中科院分区:
化学1区
文献类型:
--
作者:
Agasti, Sarit S.;Liong, Monty;Peterson, Vanessa M.;Lee, Hakho;Weissleder, Ralph

文献摘要

参考文献

被引文献

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DNA 条形码是一项颇具吸引力的技术,因为它可以进行灵敏且多重的目标分析。然而,细胞蛋白的 DNA 条形码仍然具有挑战性,主要是因为条形码扩增和读出技术通常与细胞微环境不兼容。在这里,我们描述了光裂解 DNA 条形码-抗体偶联方法的开发和验证,用于快速、定量和多重检测单个活细胞中的蛋白质。目标结合后,该方法允许 DNA 条形码在溶液中光释放,从而轻松分离、扩增和读出。作为原理证明,我们展示了对多种癌细胞中蛋白质生物标志物的灵敏和多重检测。
DNA barcoding is an attractive technology as it allows sensitive and multiplexed target analysis. However, DNA barcoding of cellular proteins remains challenging, primarily because barcode amplification and readout techniques are often incompatible with the cellular microenvironment. Here, we describe the development and validation of a photocleavable DNA barcode-antibody conjugate method for rapid, quantitative and multiplexed detection of proteins in single live cells. Following target binding, this method allows DNA barcodes to be photoreleased in solution, enabling easy isolation, amplification and readout. As a proof of principle, we demonstrate sensitive and multiplexed detection of protein biomarkers in a variety of cancer cells.
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