DENV-2 诱导 HUVECs 自噬和影响细胞活力的研究
DENV-2 诱导 HUVECs 自噬和影响细胞活力的研究
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DOI：
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发表时间：
2018
期刊：
影响因子：
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通讯作者：
孔维莹
中科院分区：
文献类型：
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作者：
毛佳璇;左丽;孔维莹
通过利用登革Ⅱ型病毒( DENV-2) 感染原代人脐静脉内皮细胞( HUVECs) 后，研究病毒诱导 HUVECs.产生自噬和对细胞活力的影响。方法: 利用 DENV-2 NGC 株感染 HUVECs，Ｒeal-time PCＲ 检测 HUVECs 中 DENV-2 NS1 基因.部分系列的表达，给予自噬诱导剂雷帕霉素( ＲAPA) 和自噬抑制剂氯喹( CQ) 预处理观察细胞自噬通量变化，激光共聚焦显微.镜观察自噬体形成; CCK-8 检测细胞活力; Western blot 检测自噬通量标志性蛋白 LC3、P62 的蛋白表达量。结果: DENV-2 感染.HUVECs 组病毒 NS1 基因在各时间点均有表达; 被感染的 HUVECs 在 24 h 时细胞活力下降不明显，36、48 h 细胞活力分别下.降至未处理组 82. 46% 和 78. 47% ，差异具有显著统计学意义( P＜0. 05) ; HUVECs 被 DENV-2 感染后，LC3-Ⅱ蛋白量表达明显.增高，自噬底物 P62 表达明显降低，36、48 h 时间点相较未处理组具有统计学意义( P＜0. 05) ，与 ＲAPA 处理组结果相似( P＞.0. 05) 。CQ 处理组 LC3-Ⅱ及 P62 蛋白量表达均明显升高，36、48 h 时间点相较未处理组具有显著性差异( P＜0. 05) 。HUVECs.被 DENV-2 感染 36 h，激光共聚焦显微镜观察到 LC3-Ⅱ表达明显高于未处理组，自噬诱导剂 ＲAPA 处理 HUVECs 后，LC3-Ⅱ表.达明显增加，自噬强度更加明显。DENV-2 与 CQ 联合处理组相较 DENV 单独处理组，36 h 细胞活力下降了 13. 61% ，差异具有.显著统计学意义( P＜0. 05) 。结论: DENV-2 感染可抑制 HUVECs 的生长; 而 DENV-2 诱导 HUVECs 产生的自噬却有利于 HUVECs.的存活。