琼脂糖明胶皮下埋植法富集、 分离具有自发NETs倾向的小鼠中性粒细胞

琼脂糖明胶皮下埋植法富集、 分离具有自发NETs倾向的小鼠中性粒细胞
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DOI:
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发表时间:
2016
期刊:
免疫学杂志
影响因子:
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通讯作者:
张静波
张静波
中科院分区:
其他
文献类型:
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作者:
王卫黎;蔡 娟;谢丽娇;王 渊;黄 鑫;高雪静;唐 莎;张 莹;王 莉;邹丽云;张静波

文献摘要

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目的 建立小鼠中性粒细胞富集、 分离的方法, 为进一步探讨中性粒细胞及中性粒细胞胞外捕网(NETs)的免疫损伤.效应奠定基础。 方法 制备2%琼脂糖0.2%明胶块, 埋植于健康6~8周龄C57雌性小鼠皮下富集中性粒细胞, 96 h后取出明.胶块置于PBS中进行游离释放, 收集细胞。荧光染色进行细胞形态学观察, 采用Gr-1及CD11b进行流式细胞分析鉴定。 结.果 不同表面积的明胶能够分离出106~107数量级细胞, 具有中性粒细胞典型的分叶核形态学特征, 流式细胞分析鉴定为Gr-1+.CD11b+的中性粒细胞, 纯度可达95.7%, 并观察到典型NETs形成, 其数量随分离时间的延长而增加。 结论 通过皮下埋植琼脂.糖明胶成功富集、 分离大量高纯度且具有自发NETs倾向小鼠中性粒细胞。