[Effect of TRAF6 Downregulation on Malignant Biological Behavior of Lung Cancer Cell Lines].
[Effect of TRAF6 Downregulation on Malignant Biological Behavior of
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DOI：
10.3779/j.issn.1009-3419.2015.11.01
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发表时间：
2015-11
期刊：
影响因子：
--
通讯作者：
Huang C
中科院分区：
文献类型：
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作者：
Lin G;Huang C;Su G;Hu H;Xu H;Huang C
已有的研究提示肿瘤坏死因子受体相关因子6(tumor necrosis factor receptor-associated factor 6, TRAF6)在肺癌中常常扩增，可能扮演癌基因角色，但TRAF6的确切作用尚未充分阐明。本研究探索TRAF6表达对肺癌细胞株的增殖、凋亡、细胞周期、迁移及侵袭能力的影响以及可能作用机制。 选用A549、H1650、SPC-A-1以及Calu-3等四种肺癌细胞株，应用蛋白印迹、qRT-PCR检测其TRAF6蛋白及mRNA表达。SPC-A-1、Calu-3细胞转染TRAF6 siRNA，以EMSA方法检测不同处理组核因子-κB的DNA结合活性，MTS法检测细胞增殖，流式细胞仪PI染色检测细胞凋亡，流式细胞仪进行细胞周期测定，划痕实验及Transwell小室法检测细胞迁移及侵袭能力，并应用蛋白印迹检测泛素化抗体、p65、CD24、CXCR4等蛋白表达。SPC-A-1细胞提取DNA后，应用二代测序法进行全基因组测序。 在四种细胞株中，SPC-A-1和Calu-3细胞TRAF6相对高表达，TRAF6发生自身K63-泛素化，但仅在SPC-A-1细胞中观察到核因子-κB组成性活化。转染TRAF6 siRNA后，SPC-A-1、Calu-3细胞TRAF6表达明显下调，与空白组及对照组相比，下调TRAF6表达可抑制SPC-A-1细胞核因子-κB活性、降低迁移及侵袭能力以及促进细胞凋亡，CD24和CXCR4的表达也明显下调，但对细胞增殖及细胞周期无明显影响。下调TRAF6表达对Calu-3细胞株的核因子-κB活性、细胞增殖、凋亡、细胞周期、迁移及侵袭能力等均无明显影响。未发现SPC-A-1细胞株TRAF6基因突变或拷贝数改变。 下调TRAF6表达可抑制SPC-A-1细胞迁移及侵袭能力，促进细胞凋亡，并且TRAF6可能是通过调控核因子-κB-CD24/CXCR4信号通路参与调控肺癌侵袭、细胞凋亡。