G蛋白偶联受体激酶4调控小鼠肾脏急性缺血再灌注损伤的机制探讨
G蛋白偶联受体激酶4调控小鼠肾脏急性缺血再灌注损伤的机制探讨
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DOI：
10.16016/j.1000-5404.201710147
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发表时间：
2018
期刊：
影响因子：
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通讯作者：
周林
中科院分区：
文献类型：
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作者：
杨东海;韩愈;巩正藩;周中淑;吴连判;傅春江;曾春雨;周林
目的探讨G蛋白偶联受体激酶4(G protein-coupled receptor kinase 4,GRK4)对小鼠肾脏急性缺血再灌注损伤的影响及其作用机制。方法取SPF级健康野生型[8周龄、体质量(21. 34 ± 0. 42) g]和GRK4转基因型[8周龄、体质量(21. 87 ± 0. 68) g]C57BL /6小鼠,各12只。各型分别按随机数字表法分为4组(n = 6) :野生型假手术对照组、野生型肾脏缺血再灌注损伤组、GRK4转基因型假手术对照组、GRK4转基因型肾脏缺血再灌注损伤组。假手术对照组均采用开腹后不阻断肾动脉血流;缺血再灌注损伤组均采用夹闭肾动脉缺血45 min再灌注24 h,建立小鼠肾脏I /R模型。各组处死小鼠后,取血标本进行肾功能检测(血肌酐、血尿素氮) ; HE染色观察肾脏病理形态改变,并行肾小管损伤半定量评分;测定肾脏组织中过氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD) 、丙二醛(malondialdehyde, MDA)等氧化应激水平改变; TUNEL染色检测肾脏组织中细胞凋亡情况;蛋白质免疫印记方法检测各组小鼠肾脏组织中GRK4和AT_1受体的蛋白表达变化。结果野生型小鼠肾脏I /R模型后肾功能受损,血肌酐、血尿素氮升高,肾脏小管上皮细胞脱落、死亡(P < 0. 05) ;肾脏组织中GRK4蛋白表达含量增加,差异有统计学意义(P < 0. 05) 。在GRK4过表达小鼠上研究结果发现,过表达GRK4的肾脏在缺血再灌注损伤后,肾功能损害进一步加重;肾脏病理损伤评分明显增加(P < 0. 05) 。肾脏氧化应激水平明显上升,总SOD下降和MDA升高(P < 0. 05) ;肾脏凋亡细胞数目显著增多(P < 0. 05) 。肾脏组织中 AT_1受体表达量增加(P < 0. 05) ,AT_1受体含量的升高可以加重小管细胞氧化应激和凋亡的发生。结论GRK4可以通过上调肾脏AT_1受体表达,增加肾脏氧化应激水平和肾小管细胞凋亡,加重肾脏缺血再灌注损伤。