HBx促进Z01的泛素化降解增加肝癌细胞迁移与侵袭

HBx促进Z01的泛素化降解增加肝癌细胞迁移与侵袭
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DOI：
10.3760/cma.j.cn501113-20201217-00660
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发表时间：
2021
期刊：
中华肝脏病杂志
影响因子：
--
通讯作者：
陈维贤
陈维贤
中科院分区：
其他
文献类型：
--
作者：
杨盛君;蒋林珊;胡琴;谢聪;詹茜;陈维贤

文献摘要

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目的研究乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)对HepG2细胞Z01表达水平的影响及闭锁小带蛋白1 (ZO-1)对肝癌细胞迁移和侵袭的作用。方法分别转染HBV全基因质粒(pcDNA3.1-HBV1.1或pcDNA3.1-HBV1.3)、空载质粒(pcDNA3.1)和HBV编码蛋白质粒(pHBc、pHBs、 pHBp. pHBx)至肝癌细胞,蛋白质印迹法(Western blot)和RT-PCR检测细胞中Z01蛋白水平及mRNA水平;转染pHBx,免疫共沉淀和Western blot检测Z01泛素化水平,Transwell小室检测细胞的迁移与侵袭。转染靶向Z01的siRNA,乳酸脱氢酶实验检测细胞的增殖,流式细胞术检测细胞的凋亡及周期,Transwell小室检测细胞的迁移与侵袭。两组数据间比较用独立样本t检验,多组数据比较用单因素方差分析。结果瞬时转染pHBVl.l和pHBVl.3后,相较于空载体对照,HepG2细胞中Z01的蛋白水平分别下降了42.99%±6.8%和55.0%5±4.56%,其mRNA水平无显著变化;Huh7细胞中Z01的蛋白水平分别下降了17.46%±4.94%和47.53%±3.38%。转染pHBx后,Z01蛋白水平下降了47.02%±3.4%,而转染pHBc、 pHBs和pHBp后Z01蛋白水平比较,差异无统计学意义。转染pHBx未影响Z01的mRNA水平。转染pHBx导致HepG2细胞中Z01泛素化水平显著增加,细胞迁移和侵袭能力增强。转染靶向Z01的siRNA后HepG2细胞的增殖、凋亡和周期无明显变化,而迁移和侵袭能力显著升高。结论HBx可通过促进Z01蛋白的泛素化降解,增加肝癌细胞的迁移与侵袭。