Rheo‐NMR Spectroscopy for Cryogenic‐Probe‐Equipped NMR Instruments to Monitor Protein Aggregation

Rheo‐NMR Spectroscopy for Cryogenic‐Probe‐Equipped NMR Instruments to Monitor Protein Aggregation
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用于监测蛋白质聚集的配备低温探针的 NMR 仪器的流变核磁共振波谱

DOI:
10.1002/cpz1.617
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发表时间:
2022
期刊:
Current Protocols
影响因子:
--
通讯作者:
Sugase Kenji
Sugase Kenji
中科院分区:
--
文献类型:
--
作者:
Morimoto Daichi;Walinda Erik;Yamamoto Akihiko;Scheler Ulrich;Sugase Kenji

文献摘要

参考文献

被引文献

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基于低温探针的流变核磁共振波谱是最近发展起来的一种方法,用于在外部剪切作用下原位获得蛋白质样品的溶液核磁共振波谱。它适用于原位蛋白质聚集的原子分辨率监测,从而有助于理解淀粉样蛋白的瞬时结构变化和状态转换,这与神经退行性疾病(如阿尔茨海默病和帕金森病)的发生和进展密切相关。在这里,我们提出了详细的实验程序的仪器设置和实用技巧,准备核磁共振测量分析蛋白质聚集的这项技术。因此,该方案将有助于未来的流变核磁共振光谱研究,不仅是蛋白质聚集,还有与剪切应力相关的其他现象,如剪切诱导的粘度增加和剪切增强的结晶。©2022 Wiley期刊有限公司基本协议1:设置一个流变核磁共振仪器基本协议2:调整玻璃棒的垂直和水平位置基本协议3:通过流变核磁共振光谱监测蛋白质聚集
Cryogenic‐probe‐based Rheo‐NMR spectroscopy is a recently developed methodology to obtain solution NMR spectra of protein samples in situ under external shear. It is applicable to atomic‐resolution monitoring of protein aggregation in situ, thereby aiding understanding of the transient structural changes and state conversion of amyloidogenic proteins, which are strongly associated with the both the onset and the progression of neurodegenerative diseases such as Alzheimer's disease and Parkinson's disease. Here, we present detailed experimental procedures for the instrumental setup and practical tips for preparation of NMR measurement to analyze protein aggregation by this technique. This protocol will thus aid future Rheo‐NMR spectroscopic studies not only of protein aggregation but also of other phenomena related to shear stress, such as shear‐induced viscosity increase and shear‐enhanced crystallization. © 2022 Wiley Periodicals LLC.Basic Protocol 1: Setup of a Rheo‐NMR InstrumentBasic Protocol 2: Adjustment of the Vertical and Horizontal Positions of the Glass StickBasic Protocol 3: Monitoring Protein Aggregation by Rheo‐NMR Spectroscopy
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