Let-7f 对人结肠癌细胞 EMT、迁移侵袭能力的影响
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通讯作者：
阮继刚
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作者：
苗雨;阮继刚
目的 探讨 Let-7f 在结肠癌组织和结肠癌细胞株中的表达，分析上调 Let-7f 对人结肠癌细胞上皮间.质转换（epithelial-mesenchymal Transition,EMT）和迁移侵袭能力的影响。方法 采用 qRT-PCR 检测 Let-7f.在结肠癌组织与癌旁组织中的表达，并检测 Let-7f 在结肠癌细胞系（HT29、 lovo、 SW480、 SW620） 和人正.常结肠上皮细胞（NCM460）中的表达；采用基因转染技术将 Let-7f 模拟物转染人结肠癌细胞株 HT29，qRT-PCR.验证转染效率； Western blot 检测转染前后结肠癌细胞中 EMT 相关分子标志物 E-cadherin、 N-cadherin 和.vimentin 的表达变化；采用划痕愈合试验、 Transwell 小室法分别检测转染后的 HT29 细胞的迁移和侵袭能.力变化。 结果 qRT-PCR 结果显示， Let-7f 在结肠癌组织中的表达水平低于癌旁组织（P<0.01） ；同时，.Let-7f 在结肠癌细胞系（HT29、 loVo、 SW480 和 SW620）中的表达量低于人正常结肠上皮细胞系（NCM460）.（P<0.01）。 转染 Let-7f mimic 48h 后， qRT-PCR 检测转染效率显示：与阴性对照组（NC 组）相比， mimic.转染组 Let-7f 表达水平升高(P<0.001)。 Western blot 结果显示： mimic 转染组细胞中 E-cadherin 表达水.平高于 NC 组（P<0.05），而 N-cadherin 和 vimentin 表达水平低于 NC 组（P<0.05） 。划痕愈合试验显示：.mimic 转染组细胞划痕愈合率低于 NC 组（P<0.05）。 Transwell 小室法显示： mimic 转染组穿过小室的细胞.数少于 NC 组（P<0.05）。 结论 Let-7f 可抑制人结肠癌细胞上皮-间质转化、迁移侵袭能力。