Rapid Isolation of Functional Synaptic Vesicles from Tissues Through Cryogrinding, Ultracentrifugation, and Size Exclusion Chromatography.
Rapid Isolation of Functional Synaptic Vesicles from Tissues Through Cryogrinding, Ultracentrifugation, and Size Exclusion Chromatography.
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通过冷冻研磨、超速离心和尺寸排阻色谱从组织中快速分离功能性突触小泡。
DOI：
10.1007/978-1-0716-1916-2_10
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发表时间：
2022
期刊：
影响因子：
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通讯作者：
Li,Huinan
中科院分区：
文献类型：
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作者：
Li,Huinan
许多生物化学和生物物理学相关的问题需要功能性突触囊泡的分离。分离的突触囊泡可用于运输动力学研究，突触囊泡内容物分析和免疫标记的特定突触囊泡蛋白质等，在这里我描述了一个快速可靠的分离程序，让研究人员分离大量的，以及生理功能的突触囊泡，按照随后的顺序cryogrinding，梯度超离心，和尺寸排阻液相色谱法。这个过程富集了超过90%的突触囊泡群体，高尔基体或内质网囊泡的污染较低。
Many biochemical and biophysical related questions require the isolation of functional synaptic vesicles. Isolated synaptic vesicles can be used for transporter kinetics studies, synaptic vesicle content analysis and immuno-labeling of specific synaptic vesicle proteins, etc. Here I describe a fast and reliable isolation procedure to allow researchers to isolate a large amount, as well as physiologically functional synaptic vesicles, by following the subsequent order of cryogrinding, gradient ultracentrifugation, and size exclusion liquid chromatography. This process enriches over 90% of the synaptic vesicle population, with low contamination of Golgi or endoplasmic reticulum vesicles.