Cryo-EM structure of a licensed DNA replication origin.
Cryo-EM structure of a licensed DNA replication origin.
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DOI：
10.1038/s41467-017-02389-0
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发表时间：
2017-12-21
影响因子：
16.6
通讯作者：
Costa A
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Abid Ali F;Douglas ME;Locke J;Pye VE;Nans A;Diffley JFX;Costa A
将 MCM 解旋酶马达装载到 DNA 上后，真核复制起点就获得许可。加载需要 MCM 水解 ATP，后催化 MCM 是一种非活性双六聚体，包围双链 DNA。起源发射取决于 Cdc45 和 GINS 的 MCM 接合以形成 CMG 全解旋酶。 CMG 组装需要几个步骤，包括通过 DDK 磷酸化 MCM。为了了解起源激活，我们在这里确定了 DNA 结合 MCM 的冷冻电镜结构（未修饰或磷酸化），并可视化可能对 Cdc45 招募很重要的磷酸依赖性 MCM 元件。 MCM 孔环接触 Watson 链和 Crick 链，将双链 DNA 限制在弯曲结构中。通过将我们的新 MCM-DNA 结构与 CMG-DNA 结构进行比较，我们提出了从加载的后催化 MCM 到 CMG 的构象转变如何促进 DNA 在复制开始时解旋和熔化。复制起点通过将 MCM 加载到 DNA 上来获得许可，起点激发取决于与 Cdc45 和 GINS 的相互作用以形成两个 CMG 全解旋酶。在这里，作者确定了 DNA 结合的 MCM 的冷冻电镜结构，并可视化了对 Cdc45 招募很重要的磷酸依赖性 MCM 元件。
Eukaryotic origins of replication are licensed upon loading of the MCM helicase motor onto DNA. ATP hydrolysis by MCM is required for loading and the post-catalytic MCM is an inactive double hexamer that encircles duplex DNA. Origin firing depends on MCM engagement of Cdc45 and GINS to form the CMG holo-helicase. CMG assembly requires several steps including MCM phosphorylation by DDK. To understand origin activation, here we have determined the cryo-EM structures of DNA-bound MCM, either unmodified or phosphorylated, and visualize a phospho-dependent MCM element likely important for Cdc45 recruitment. MCM pore loops touch both the Watson and Crick strands, constraining duplex DNA in a bent configuration. By comparing our new MCM–DNA structure with the structure of CMG–DNA, we suggest how the conformational transition from the loaded, post-catalytic MCM to CMG might promote DNA untwisting and melting at the onset of replication. Origins of replication are licensed by loading of MCM onto DNA, and origin firing depends on interaction with Cdc45 and GINS to form two CMG holo-helicases. Here, authors determine the cryo-EM structures of DNA-bound MCM and visualise a phospho-dependent MCM element important for Cdc45 recruitment.
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影响因子：
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作者：
Kucukelbir, Alp;Sigworth, Fred J.;Tagare, Hemant D.
通讯作者：
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影响因子：
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作者：
Duderstadt, Karl E.;Chuang, Kevin;Berger, James M.
通讯作者：
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DOI：
10.1073/pnas.0911500106
发表时间：
2009-12-01
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11.1
作者：
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通讯作者：
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通讯作者：
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作者：
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