Optimizing sample preparation for 2-D electrophoresis

Optimizing sample preparation for 2-D electrophoresis
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优化二维电泳的样品制备

DOI:
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发表时间:
2001
期刊:
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影响因子:
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通讯作者:
S. Souchelnytskyi
S. Souchelnytskyi
中科院分区:
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文献类型:
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作者:
T. Stasyk;U. Hellman;S. Souchelnytskyi

文献摘要

被引文献

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二次元電気泳動において高解像度で鮮明な泳動パター ンを得るうえで、サンプル調製は非常に重要なステップ です。タンパク質の泳動パターンに悪影響を与える問題 は、多くの場合、細胞からの抽出時に混入するタンパク 質以外の夾雑物に起因すると考えられています(1)。こ れらの問題を解決するために、さまざまな手法が開発さ れてきましたが、サンプルごとに新たに条件検討を行う 必要があり、ある程度の熟練を要します。 現在は、細胞抽出物を何らかの方法で分画して解析に 用いるのが一般的なサンプル調製法となっています。タ ンパク質を精製するには沈殿法のほか、特定のタンパク 質の特性を利用して分離する方法などが用いられます (2)。これらの方法の多くはタンパク質や夾雑物の特性 に依存しており、サンプルごとに条件検討が必要です。 そのため、手間のかかる煩雑な条件検討が不要で、夾雑 物の影響を受けにくく、そして汎用性の高い方法が求め られています。本報では、以下の1.~4.の方法で調製した サンプルを二次元電気泳動して、調製法の良否を検討し ました。