Assaying NanoLuc Luciferase Activity from mRNA-Injected Xenopus Embryos.

Assaying NanoLuc Luciferase Activity from mRNA-Injected Xenopus Embryos.
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测定注射 mRNA 的非洲爪蟾胚胎中的 NanoLuc 荧光素酶活性。

DOI:
10.1007/978-1-4939-9009-2_3
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发表时间:
2019
期刊:
Methods in molecular biology (Clifton, N.J.)
影响因子:
--
通讯作者:
Sheets,MichaelD
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中科院分区:
--
文献类型:
--
作者:
Sheets,MichaelD

文献摘要

参考文献

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动物发育的最早阶段取决于转录后事件,这些事件驱动胚胎细胞周期并指导细胞命运决定。转录后调控事件的分析依赖于使用嵌合报告基因mRNA,其编码与潜在调控序列融合的萤火虫荧光素酶。最近开发的一种新的更敏感的荧光素酶称为NanoLuc,有可能改善报告研究,并为胚胎过程的调控提供新的见解。在这里,我描述了如何创建和分析报告基因编码的NanoLuc荧光素酶提取物从microinjectedXenopus胚胎。
The earliest steps of animal development depend upon posttranscriptional events that drive the embryonic cell cycle and guide cell fate decisions. The analysis of post-transcriptional regulatory events has relied upon the use of chimeric reporter mRNAs that encode firefly luciferase fused to potential regulatory sequences. A new and more sensitive luciferase developed recently called NanoLuc has the potential to improve reporter studies and provide new insights into the regulation of embryonic processes. Here I describe how to create and analyze reporter mRNAs encoding NanoLuc luciferase using extracts from microinjectedXenopusembryos.
用乙二醛对 RNA 进行变性和电泳。
DOI: 10.1101/pdb.prot081000
发表时间: 2015
影响因子: --
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D. Rio
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作者:
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