大葱4-香豆酸辅酶A连接酶基因Af4CL的克隆及表达分析

大葱4-香豆酸辅酶A连接酶基因Af4CL的克隆及表达分析
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DOI：
10.3969/j.issn.1674-7968.2023.02.006
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发表时间：
2023
期刊：
农业生物技术学报
影响因子：
--
通讯作者：
刘乐承
刘乐承
中科院分区：
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文献类型：
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作者：
李逸;徐欢欢;张宇辰;王永勤;刘乐承

文献摘要

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4-香豆辅酶A连接酶(4-coumaric acid coenzyme A ligase,4CL)是类黄酮合成途径的一个关键酶,催化羟基香豆酸形成香豆酰辅酶A,香豆酰辅酶A是植物类黄酮生物合成的起始底物。本研究以大葱(Allium fistulosum)为材料,克隆了编码大葱4-香豆酸辅酶A连接酶的基因Af4CL (GenBank NO.OP921007),并进行了生物信息学分析,同时对Af4CL基因进行亚细胞定位和原核表达系统分析;结果显示,Af4CL编码区全长1 644 bp,编码547个氨基酸;生物信息学分析表明,Af4CL具有2个保守结构域Box Ⅰ和BoxⅡ;进化分析结果表明,大葱Af4CL与大蒜(Allium sativum)As4CL的亲缘关系最近。构建Pro35S:Af4CL-GFP载体,并利用根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导的烟草(Nicotiana tabacum)叶片瞬时表达系统对Af4CL的定位进行了分析表明,Af4CL定位于细胞膜;利用原核表达系统成功诱导出目的蛋白。本研究为大葱类黄酮代谢的深入研究及类黄酮体外合成提供了参考。