苔黑酚葡萄糖苷通过抑制糖皮质激素受体入核保护地塞米松诱导成骨细胞损伤作用
苔黑酚葡萄糖苷通过抑制糖皮质激素受体入核保护地塞米松诱导成骨细胞损伤作用
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DOI：
10.12360/cpb202208127
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发表时间：
2023
期刊：
影响因子：
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通讯作者：
秦路平
中科院分区：
文献类型：
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作者：
何心芸溪;赵婉璐;俞阳;刘燕;张巧艳;张泉龙;秦路平
目的考察苔黑酚葡萄糖苷对地塞米松(dexamethasone,DEX)诱导成骨细胞损伤的保护作用,并探讨其调控机制。方法从新生小鼠颅盖骨提取并培养原代成骨细胞(osteoblast,OB),用DEX(1 μmol·L~(-1))诱导成骨细胞损伤为模型。采用CCK-8法测定不同浓度苔黑酚葡萄糖苷及有无DEX干预下对成骨细胞增殖的影响;采用试剂盒进行成骨细胞碱性磷酸酶(ALP)染色和ALP活性测定;采用茜素红S染色观察骨矿化结节的形成;采用Annexin V-FITC法检测细胞凋亡情况;采用免疫荧光结合激光共聚焦显微镜观察细胞内糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)的入核情况;采用Western blot法检测GR在细胞核、细胞质和全细胞中的蛋白表达,以及细胞中成骨特征蛋白Collagen Ⅰ、 Runx2、Osterix(Osx)和Dlx5的表达。结果与对照组相比, DEX组成骨细胞增殖、分化和矿化均明显降低(P < 0.05、 0.01),细胞凋亡明显升高(P < 0.01);与模型组相比,苔黑酚葡萄糖苷组成骨细胞增殖、分化和矿化均明显升高(P < 0.01),细胞凋亡明显降低(P < 0.05)。与对照组相比,DEX组成骨细胞中GR在核内的表达明显升高(P <0.01),而GR在全细胞和细胞质中的表达明显降低(P < 0.01),同时成骨特征蛋白表达也明显降低(P < 0.01);与模型组相比,苔黑酚葡萄糖苷组GR在成骨细胞核内的表达明显降低(P < 0.01),而GR在全细胞和细胞质中的表达明显升高(P < 0.01),成骨特征蛋白的表达均明显升高(P < 0.01),且呈剂量依赖关系。结论苔黑酚葡萄糖苷能够改善DEX诱导的成骨细胞增殖、分化和矿化的抑制作用,并减少其凋亡,其作用机制与苔黑酚葡萄糖苷抑制GR入核,从而调控成骨相关蛋白表达有关。