Capillary electrophoresis for the detection of known point mutations by single-nucleotide primer extension and laser-induced fluorescence detection.
Capillary electrophoresis for the detection of known point mutations by single-nucleotide primer extension and laser-induced fluorescence detection.
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毛细管电泳通过单核苷酸引物延伸和激光诱导荧光检测来检测已知点突变。
DOI：
10.1016/s0021-9673(97)00637-7
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发表时间：
1997
期刊：
影响因子：
--
通讯作者：
Barry L. Karger
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Christine A. Pigge;Jochen Muth;E. Carrilho;Barry L. Karger
毛细管电泳（CE）与激光诱导荧光（LIF）用于检测已知的点突变，使用单核苷酸引物延伸（SNuPE）的方法。通过将引物紧邻模板上突变的5 '端退火，并通过与突变互补的荧光标记的双脱氧终止子延伸引物，检测到与Leber遗传性视神经病变（LHON）相关的人类线粒体DNA中的三种不同点突变。通过使用两种或更多种不同标记的终止子，可以同时检测突变体和野生型。使用CE-LIF检测SNuPE反应的优点包括分析速度快、容易、无放射性和自动化潜力。
Capillary electrophoresis (CE) with laser-induced fluorescence (LIF) was used to detect known point mutations using the method of single-nucleotide primer extension (SNuPE). Three different point mutations in human mitochondrial DNA associated with Leber's hereditary optic neuropathy (LHON) were detected by annealing a primer immediately 5′ to the mutation on the template and extending the primer by one fluorescently labeled dideoxy terminator complementary to the mutation. By using two or more differently labeled terminators, both the mutant and wild type could be simultaneously detected. The advantages of using CE-LIF for detecting SNuPE reactions include speed and ease of analysis, absence of radioactivity, and potential for automation.
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