SGK-1 在缺氧诱导小鼠垂体瘤细胞 AtT-20 增殖、凋亡中的表达及作用探讨

SGK-1 在缺氧诱导小鼠垂体瘤细胞 AtT-20 增殖、凋亡中的表达及作用探讨
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DOI:
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发表时间:
2017
期刊:
山东医药
影响因子:
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通讯作者:
张玮
张玮
中科院分区:
其他
文献类型:
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作者:
韦睿;吴杰;曾伟;张玮

文献摘要

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目的 观察血清和糖皮质激素调节蛋白激酶1( SGK-1) 在缺氧诱导小鼠垂体瘤细胞 AtT-20 增殖、凋亡中 的表达,并探讨其在这一过程中的作用。方法 将 AtT-20 细胞随机分为观察组和对照组,观察组分别加入50、 100、200 μmol/L CoCl2( 模拟缺氧) ,对照组不处理,采用 MTT 法检测 24、 48、 72、96 h 时细胞增殖的 A570值; 将 200 μmol/L CoCl2 加入 AtT-20 细胞,培养 0、 24、 48、 72、96 h 时采用流式细胞术测算细胞凋亡率,分别采用半定量 PCR 法和 Western blot 法检测 SGK-1 mRNA 及蛋白。将 AtT-20 细胞随机分为4 组, A、 B 组转染干扰质粒 SGK-1 siRNA, C、 D 组转染对照质粒 siCon,转染24 h 后 A、 C 组加入200 μmol/L CoCl2, B、 D 组不处理,分别采用 MTT 法和流式细 胞术检测24、 48、 72、96 h 时细胞增殖的 A570值及细胞凋亡率。结果 缺氧处理 72 h 后,观察组随着 CoCl2 浓度增 加及作用时间延长,AtT-20 细胞增殖的 A570值逐渐降低,与对照组比较差异有统计学意义( P 均 <0. 05) 。与 0 h 时 比较,处理24、48 h 时细胞凋亡率无明显变化,处理72、96 h 时细胞凋亡率增加( P 均 < 0. 05) ; 与 0 h 时比较,处理 24、 48 时 AtT-20 细胞 SGK-1 mRNA 及蛋白表达量均增加( P 均 < 0. 05) ,72 h 后其表达量无显著变化( P 均 > 0. 05) 。A 组缺氧后各时点细胞增殖的 A570值均低于其余各组, C 组缺氧后 72、96 h 细胞增殖的 A570值高于 A 组而 低于B、 C 组( P 均 <0. 05) 。A 组缺氧后各时点细胞凋亡率均高于其余各组, C 组缺氧后72 h 细胞凋亡率低于A 组 而高于 B、 C 组( P 均 <0. 05) 。结论 缺氧可抑制 AtT-20 细胞增殖、促进其凋亡,该过程中 SGK-1 表达增加可保护 细胞免受缺氧导致的损伤。