Fluorescent in situ mRNA detection in the adult mouse cochlea.
Fluorescent in situ mRNA detection in the adult mouse cochlea.
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DOI：
10.1016/j.xpro.2021.100711
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发表时间：
2021-09-17
期刊：
影响因子：
--
通讯作者：
Heller S
中科院分区：
文献类型：
--
作者：
Diaz GH;Heller S
耳蜗管的骨化和脆弱性使得成熟耳蜗的组织学评估成为一项具有挑战性的奋进。软化骨的处理有利于耳蜗管的切片和解剖，但限制了此类标本中原位mRNA的检测。在这里，我们提供了一个协议，原位mRNA检测使用杂交链反应在整装制剂的成年小鼠耳蜗。我们展示了不同mRNA的多探针检测的例子，并描述了这种方法与传统免疫组织化学的结合。说明准备成年小鼠耳蜗的整体安装组织学应用程序的修改杂交链反应协议成年耳蜗mRNA原位检测配对免疫染色和成像骨化和微妙的耳蜗导管的成熟耳蜗的组织学评估具有挑战性的奋进。软化骨的处理有利于耳蜗管的切片和解剖，但限制了此类标本中原位mRNA的检测。在这里，我们提供了一个协议，原位mRNA检测使用杂交链反应在整装制剂的成年小鼠耳蜗。我们展示了不同mRNA的多探针检测的例子，并描述了这种方法与传统免疫组织化学的结合。
Ossification and the delicateness of the cochlear duct make histologic assessments of the mature cochlea a challenging endeavor. Treatments to soften the bone facilitate sectioning and dissection of the cochlear duct but limit in situ mRNA detection in such specimens. Here, we provide a protocol for in situ mRNA detection using hybridization chain reaction in whole-mount preparations of the adult mouse cochlea. We show examples for multi-probe detection of different mRNAs and describe combination of this method with conventional immunohistochemistry. Instructions for preparing the adult mouse cochlea for whole-mount histology applications Modifications for hybridization chain reaction protocol Adult cochlea mRNA in situ detection paired with immunostaining and imaging Ossification and the delicateness of the cochlear duct make histologic assessments of the mature cochlea a challenging endeavor. Treatments to soften the bone facilitate sectioning and dissection of the cochlear duct but limit in situ mRNA detection in such specimens. Here, we provide a protocol for in situ mRNA detection using hybridization chain reaction in whole-mount preparations of the adult mouse cochlea. We show examples for multi-probe detection of different mRNAs and describe combination of this method with conventional immunohistochemistry.
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